人源共培养模型重现肺泡细胞的异常分泌表型
特发性肺纤维化中的细胞相互作用，会改变肺泡上皮的分化与修复。德国萨尔大学（Saarland University）及中国同济大学（Tongji University）等团队在 Molecular Medicine 报道人源共培养研究，把肺泡Ⅱ型细胞（alveolar type 2 cell，AT2）与原代肺成纤维细胞放入类器官培养。
AT2 细胞经过分选后，在 Matrigel 中培养 21 天；共培养组加入等比例的成纤维细胞。研究分别比较没有成纤维细胞、加入原代细胞以及使用 MRC5 细胞系的模型。
单独培养时，超过 95% 的类器官呈葡萄簇状。加入原代成纤维细胞后，类器官直径增大，并形成明显的囊状结构；MRC5 虽使类器官变大，却未产生同样的囊状变化。
成纤维细胞改变 AT2 细胞组成与标志物
单细胞分析使用 3 名供者的成纤维细胞。供者分别有肺癌、伴慢性阻塞性肺疾病的肺癌或肺纤维化背景，取材来自无病变区域。扩增后的细胞均表现出较高的胶原及促纤维化相关基因表达。
共培养使上皮细胞更多地转向异常 AT2 状态：肺表面活性蛋白 C（SFTPC）表达降低，黏蛋白 5B（MUC5B）和炎症相关分泌因子增加。染色与转录检测支持这一变化，类器官仍未出现典型气道基底细胞标志。
团队还在人肺纤维化病灶中观察到 MUC5B 与部分 SFTPC 阳性细胞关联。组织结果为培养表型提供了疾病参照；模型中的成纤维细胞状态同时受到扩增和培养环境影响。
IL-6 刺激可诱导相似的囊状表型
共培养上清中的白细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）升高，异常 AT2 细胞中 STAT3 信号活跃。研究从接种时开始加入 IL-6，随后也观察到囊状生长、MUC5B 表达增加及 SFTPC 降低。
配体与受体分析提示上皮细胞和成纤维细胞之间存在双向信号。部分相互作用来自计算预测，团队进一步用生长分化因子和白血病抑制因子刺激成纤维细胞，检测其 IL-6 分泌。
这些实验把异常分泌表型与持续的细胞信号联系起来，也使模型具备检验药物是否干预该过程的具体终点。
达沙替尼减少囊状结构，SFTPC 降低仍然存在
团队预先用达沙替尼处理成纤维细胞，并在后续共培养中持续加入药物。检测浓度为 200 nM，观察至第 21 天；未加成纤维细胞的培养也设置了相应药物对照。
加入成纤维细胞的模型中，达沙替尼减少囊状类器官的形成与 MUC5B 染色。没有成纤维细胞时，药物提高 SFTPC、降低 MUC5B 表达，但葡萄簇状形态及直径没有相应变化。药物比较汇总了 3 次独立实验的结果。
在成纤维细胞共培养中，达沙替尼减少 STAT3 磷酸化，但没有逆转 SFTPC 表达降低。药物对囊状结构、黏蛋白和肺泡细胞标志的作用因检测指标而异。
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成纤维细胞来源与扩增影响模型表型
原代成纤维细胞需要先在二维条件下扩增，这一步本身就可能增强促纤维化状态。培养液中的信号调节成分也可能改变细胞间相互作用，模型因此用于研究培养条件下的异常分化及其药物干预。
这一人源共培养模型同时提供了囊状结构、MUC5B 表达和 SFTPC 表达等检测指标。达沙替尼实验显示，减少异常结构及黏蛋白表达，与恢复肺泡细胞标志，是反应不同的两项结果。