早期视黄酸与 BMP7 促进肾单位和集合管形成
韩国研究团队希望在同一肾类器官中形成肾单位与集合管。研究采用 H9 人胚胎干细胞及不同来源的诱导多能干细胞（iPSC），在中间中胚层形成期调节视黄酸（RA）的浓度与时间，再以骨形态发生蛋白 7（BMP7）促进后续肾组织分化。
优化条件采用 0.1 μM RA 短期处理 2 天，随后将细胞聚集成团，再转入胶原支持的培养膜。BMP7 处理提高肾小管腔结构、极性和节段相关标志。RA 或 BMP7 信号抑制条件减弱相应形成过程，提供了分化条件比较。
单细胞转录组比较了类器官与 11、16 周人胎肾数据，显示肾小管、集合管和肾小球相关细胞群。该比较主要描述细胞组成与表达成熟特征；药物功能则通过后续转运和损伤试验评价。
类器官衍生上皮检测白蛋白摄取与药物转运
团队把肾小管类器官解离后建立 Transwell 上皮单层，在气液界面培养 18 天，得到肾类器官衍生肾小管上皮细胞（KORTECs）。与 HK-2 细胞相比，该单层的跨上皮电阻较高、示踪葡聚糖渗漏较低，白蛋白摄取及相关受体表达增加。
从基底侧加入荧光探针 CDFDA 后，上侧可检测其水解产物 CDF；加入转运抑制剂 MK571 使这一过程降低。另一个试验从基底侧加入磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）抑制剂 alpelisib，48 小时后两个侧室均检出药物，并随加入浓度变化。图 6 图注将 alpelisib 试验的方向标为上侧至基底侧，与结果段的给药方向相反，原文在这一条件上存在差别。
肠—肝—肾循环培养增加对乙酰氨基酚相关损伤
肾类器官先接受直接肾毒性药物测试。25 μM 顺铂、20 μM 环孢素 A 和 2.5 μM 多柔比星处理后，结果段报告凋亡细胞比例分别为 75%、56% 和 65%，并出现肾损伤及凋亡相关表达增加。庆大霉素试验还在集合管相关区域观察到明显细胞死亡。
团队随后把 Caco-2 肠上皮、HepaRG 肝细胞和肾类器官接入网络循环培养系统（NCCS），以对乙酰氨基酚测试吸收、代谢与肾损伤之间的联系。培养液中，对乙酰氨基酚（APAP）的谷胱甘肽与半胱氨酸结合物、4-氨基酚随时间增加。与肾类器官单独培养相比，完整系统中的肾类器官凋亡和损伤标志表达升高，肾小管及集合管中可见活化 caspase-3。
图 7 的凋亡与损伤基因结果每组 4 个重复，活化 caspase-3 定量每组 6 个重复。研究以循环培养和单独培养进行条件比较，展示了肝代谢参与时的肾损伤差别。
三维肾类器官与衍生单层用于不同实验
类器官衍生二维单层提供屏障、摄取和转运指标，三维肾组织则用于节段与药物损伤评价。胎肾转录组提供发育参照，NCCS 比较进一步纳入肠上皮与肝代谢。研究将这些不同格式结合，用于体外代谢相关肾损伤研究。