上皮与成纤维细胞共同构成肺泡类器官
肺纤维化的发生涉及肺泡上皮损伤和周围成纤维细胞反应。日本京都大学（Kyoto University）等团队在 Stem Cell Reports 报道一种共培养肺泡类器官，利用人源细胞研究两类细胞之间的相互作用及药物干预。
团队把人多能干细胞（human pluripotent stem cell，hPSC）分化得到的肺泡Ⅱ型细胞与人胎肺成纤维细胞一同放入 Matrigel。上皮细胞形成肺泡样结构，成纤维细胞与基质为其提供三维共培养环境。
该模型的细胞来源和损伤方式均由研究者设定。研究关注可控制的人源肺泡损伤与纤维化相关反应，模型建立没有采用特发性肺纤维化患者的组织活检。
博来霉素诱导上皮损伤及基质收缩
培养第 11–14 天，团队加入 3 μg/mL 博来霉素，随后移除药物继续观察。基质收缩在含肺泡上皮的共培养中更明显，成纤维细胞单独培养的反应较弱。
处理后，上皮细胞数量和比例下降，成纤维细胞数量没有同样改变。肺泡样结构变薄、直径增大，并出现 p21 和衰老相关 β-半乳糖苷酶等变化。配套检测还发现，部分炎症分泌相关基因及肺泡Ⅱ型向Ⅰ型转变过程中的中间状态标志升高。
团队对基质相关蛋白进行分析，在升高的蛋白中识别出多种细胞外基质组织相关成分。这些观察将细胞损伤、上皮状态和基质变化放在同一模型中比较。
筛选与同类抑制剂比较支持 ALK5 靶点
研究在博来霉素处理结束后给予候选化合物，于第 17 天分析类器官。初筛中，p38 抑制剂 SB203580 与激活素受体样激酶 5（activin receptor-like kinase 5，ALK5）抑制剂 SB525334 均降低部分衰老分泌和异常分化标志，随后用结构不同的同类抑制剂检验结果。
ALK5 抑制剂的验证结果较一致。SB525334 减少 IL6、CXCL8、SERPINE1 等衰老相关分泌表型基因，以及 SFN、GDF15、MMP7 等中间状态标志。部分肺泡Ⅰ型细胞相关标志随处理增加，为上皮状态改变提供了补充观察。
这些变化没有伴随上皮细胞比例或类器官直径完全恢复。药物对表达状态和形态的作用被分别检测，结果集中在部分损伤相关表型的改善。
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整合素 αVβ6 干预补充了上皮侧的作用线索
团队进一步观察到，上皮细胞的整合素 αVβ6 表达增加。该整合素参与局部转化生长因子 β（transforming growth factor β，TGF-β）活化过程。研究采用 αVβ6 拮抗剂 GSK3008348，报告部分基质收缩及表达指标降低，为上皮侧干预提供了另一组比较。
在培养上清中，团队没有直接检出活化 TGF-β1。相应通路的判断结合了细胞表达、外加活化 TGF-β1 的比较和靶点干预结果，现有数据没有提供上清中持续可测的活化蛋白浓度。
ALK5 抑制还降低部分胶原及其合成相关蛋白，其他基质相关蛋白的变化则不完全一致。各类蛋白与形态指标分别反映药物的作用。
筛选结果来自上皮与成纤维细胞的短期共培养
本模型同时包含上皮与成纤维细胞，适合研究化学损伤后两者的相互作用及药物干预。上皮成熟程度、细胞组成与成人肺组织仍有差别，模型未加入免疫细胞及呼吸相关机械形变。
博来霉素可影响共培养中的多类细胞，药物评价窗口也较短。研究提供的是人源肺泡模型中的筛选结果与机制线索，直接比较的重点为基质收缩、上皮状态和相关分泌表型。