同时干预 WNT 与维甲酸信号
研究团队希望通过同时干预 WNT 和维甲酸信号，抑制结直肠癌细胞生长并促进分化。研究发表于 Cancer Biology & Therapy，先在细胞系中筛选药物组合，再把部分组合带入人源结直肠癌类器官和患者来源异种移植瘤模型。
研究使用舒林酸、吡罗昔康作为 WNT 干预药物，与全反式维甲酸、9-顺式维甲酸，或抑制维甲酸代谢的利阿唑、他拉唑组合。后两种药物针对 CYP26A1，作用方式与直接加入维甲酸不同。作者把这些组合放在同一研究中，比较它们对肿瘤细胞生长与分化的影响。
协同效应取决于细胞系
细胞筛选涉及 HT29、HCT116 和 SW480，共考察超过 10,000 个剂量反应。这 3 种细胞系都具有可激活 WNT 的基因改变，但具体背景不同：HT29 和 SW480 带有 APC 变异，HCT116 带有 CTNNB1 变异；它们的维甲酸受体基因状态也不相同。
作者根据各药物单独作用时的效力设置组合，并采用 Bliss 独立模型区分相加、协同和拮抗。部分组合在 HCT116 中表现为协同，在 HT29 中主要表现为相加；SW480 的协同反应则出现在他拉唑与舒林酸组合。组合的表现取决于所用细胞背景。
分化标志与基因表达的变化
在 HCT116 中，9-顺式维甲酸与舒林酸组合降低了 ALDH 阳性细胞比例，并提高神经内分泌分化相关标志。HT29 和 SW480 并未出现同样的 ALDH 变化，SW480 的分化标志也没有相同反应。生长受到抑制与分化发生变化，在本研究中是需要分别观察的结果。
研究还在 HCT116 和 SW480 中开展 NanoString 表达分析。舒林酸改变了 WNT 相关基因的表达，并改变维甲酸相关药物对部分基因的调节方向。作者据此认为，两类药物作用于不同但相互关联的信号过程，为组合增强药效提供了机制线索。
用类器官比较组合与单药
类器官实验使用美国典型培养物保藏中心（American Type Culture Collection，ATCC）的 HCM-CSHL-0257-C18 模型。该模型带有导致 APC 截短的变异，资料中未列出维甲酸受体变异。研究比较单药与组合处理，通过活死细胞染色观察类器官中的药物反应。
Figure 7 显示，舒林酸与维甲酸相关药物组合处理后，死细胞与活细胞信号的比值高于单药处理。显微图像和相应定量分析显示组合处理后的 PI/AO 信号比升高。这部分证据来自 1 个类器官模型，与前述 3 种细胞系的组合筛选互为补充。
窄屏可横向滑动查看完整图表。
三药合用组的移植瘤体积较小
研究另外在带有 CTNNB1 变异的结直肠癌患者来源移植瘤中比较药效。舒林酸、利阿唑与 9-顺式维甲酸三药组合的肿瘤体积较低，但各组肿瘤仍持续生长；体重总体稳定。体外类器官的死亡信号与小鼠肿瘤生长，是两种不同的评价终点。
作者提出进一步研究 WNT 抑制剂与维甲酸相关药物的组合。