4 位供者的近端小管细胞，同时用于二维和灌流培养
华盛顿大学（University of Washington）等机构在 bioRxiv 发布预印本，比较环孢素 A 与其类似物伏环孢素（voclosporin）对人近端小管细胞的影响。研究结合二维培养、三维灌流、线粒体成像及转录组，观察两药的早期应激差别。
细胞来自 4 位正常成人肾供者，女性与男性各 2 位。研究将同类细胞用于二维单层，或接种到胶原内的微通道，在 0.5 μL/min 持续流动条件下形成小管。主要比较采用 10 μM 药物处理 48 小时，并使用匹配乙醇溶剂参照。
活性和 KIM-1 未区分两药，多指标变化出现差别
二维单层的 MTS 活性检测在 0.01–10 μM 范围未见明显毒性。三维灌流流出液中的肾损伤分子 1（KIM-1）在 48 小时内维持基线，另行延长至 14 天的观察也未见明显升高。
团队随后测量 8 个损伤和炎症相关指标，按每位供者对应溶剂参照计算变化。把每个指标的 24 与 48 小时结果平均后，环孢素 A 的绝对变化总体大于伏环孢素，两药平均差为 0.72 个 log2 单位。
汇总值采用相对参照变化的绝对值，反映各指标升降的幅度；24 小时与 48 小时可用供者数也有不同。按这一方式比较，环孢素 A 使整体指标偏离基线的程度较大。
线粒体形态与膜电位检测补充不同信息
共聚焦图像中，环孢素 A 处理细胞的线粒体呈点状和碎片化，伏环孢素组较多保持网状。二维细胞的分支数与投影面积没有显著组间下降；三维小管重建中，环孢素 A 的丝状面积与溶剂组也未见显著差异。
另在二维细胞进行的四甲基罗丹明甲酯（TMRM）染色与流式分析显示，伏环孢素组阳性比例最高，在部分供者中高于环孢素 A 组。两药组的阳性比例均高于溶剂参照。
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三维培养的转录组显示两药反应范围不同
48 小时后的小管 RNA-seq 中，环孢素 A 与参照相比有 1,492 个差异表达基因，伏环孢素有 489 个；两组共同基因为 304 个，各自特有为 1,188 与 185 个。
作者进一步分析内质网蛋白处理、细胞周期和铁死亡相关基因。环孢素 A 的表达变化涉及较广的应激与周期调节，伏环孢素更集中于蛋白折叠和质量控制。这里的通路解释主要来自转录模式，直接脂质过氧化、铁状态与细胞周期功能仍是后续验证内容。
另一项分析根据差异 mRNA 推测 miRNA 调节关系，没有直接测量 miRNA。作者将其用于提出下一步检测候选，同时计划增加血管与免疫成分、延长灌流观察，以研究早期应激和持续损伤之间的关系。研究目前仍为未经过期刊同行评议的预印本。