
先检验模型建立与药物测试的可行性
法国 Université de Caen Normandie 与 Centre François Baclesse 等机构在 BMC Cancer 公布 PENDOR 研究方案。它是一项单中心非干预先导研究,首先考察子宫内膜癌手术组织能否建立可用的患者来源类器官,再评估化疗及聚(ADP-核糖)聚合酶(poly(ADP-ribose) polymerase,PARP)抑制剂药物测试的可行性。
方案计划纳入 16 名接受手术的患者,使用病理诊断之外剩余的肿瘤材料。样本量按建模可行性估计设计,论文尚未给出实际入组人数、成功模型数或药物预测准确率。
研究拟把模型反应与患者化疗结局、同源重组修复缺陷(homologous recombination deficiency,HRD)检测对应,探索哪些患者可能从 PARP 抑制剂中获益。不同检测的比较是该方案的主要研究内容之一。
扩增、冻存恢复及模型身份分别检查
肿瘤组织将通过机械或酶消化形成细胞及小细胞簇,在 BME-2 基质中培养。方案安排每周 2 次换液、每 2–4 周传代;连续扩增 5 代且冻存后能恢复生长,作为模型建立标准。
模型与原肿瘤还将接受病理、转录组和拷贝数变化比较。研究以这些检测评估培养后的模型保留了哪些肿瘤特征,并寻找与药物反应相关的分子指标。
GIScar 检测则从基因组不稳定性判断 HRD 状态。该检测最初用于卵巢癌,PENDOR 计划针对子宫内膜癌进一步优化,再与功能药敏结果比较。
化疗与免疫测试采用不同实验设计
药物测试拟在直径约 100 µm 的类器官上进行,使用 96 孔板和 2% BME-2 处理液。接种 1 小时后加药,培养液去除 N-乙酰半胱氨酸、Y-27632 和 Primocin;终点用 CellTiter-Glo 3D 测 ATP,并计算 IC50 及浓度—反应曲线下面积。
方案另准备患者自体 T 细胞,用相应类器官裂解物激活,并按 CD154 和 CD137 标志筛选扩增。随后通过共培养、实时成像和细胞活力标记,分别观察肿瘤细胞及 T 细胞的变化,并设置主要组织相容性复合体 I 类(major histocompatibility complex class I,MHC-I)阻断条件作为抗原特异性杀伤对照。
临床分析拟计算模型与治疗结局的分歧比例、kappa 一致性系数、敏感度和特异度。免疫共培养结果也计划对应患者无进展、无病及总生存等临床结局。
先导研究之后再评价临床预测表现
作者将 PENDOR 定位为可行性和概念验证。若模型建立和测试顺利,后续将开展规模更大的研究,重点考察功能药敏能否在临床可接受的时间内完成,并为治疗选择提供实际信息。
论文提供了模型建立、基因组检测与功能药敏的比较路线。建模成功率、药物反应差异及患者获益,仍属于该方案将要收集的数据。