
从 5 名患者及其移植瘤建立 3 类模型
美国新墨西哥大学(University of New Mexico)团队在 BMC Cancer 比较了直接患者来源和小鼠移植瘤来源的卵巢癌类器官。研究希望利用可反复扩增的移植瘤,为体外药物筛选提供持续的患者肿瘤材料。
5 名高级别浆液性癌患者包括 2 名铂敏感、2 名铂耐药和 1 名铂难治病例。团队首先从患者恶性腹水建立直接患者来源类器官(patient-derived organoid,PDO);再将同一来源的肿瘤细胞移植到免疫缺陷鼠,分别从移植瘤腹水和实体瘤建立移植瘤来源类器官(patient-derived xenograft organoid,PDXO)。
腹水来源模型整体生长较慢、体积较小;移植实体瘤来源模型通常在 2–3 天出现小结构,并在 6–9 天形成较大类器官。形态和生长速度虽有区别,团队用相同药物条件继续比较反应。
按相同剂量进行 72 小时药物比较
模型在 UltiMatrix 中建立,至少传代 3 次后进行药物实验;本研究采用第 3–9 代。每个 96 孔板孔中放入 20–30 个类器官,使用 5 µL 基质滴和 200 µL 培养液,接种次日开始给药。
给药条件为卡铂 1 µM、紫杉醇 10 nM 及二者组合,处理 72 小时。CellTiter-Glo 3D 测 ATP 发光,另设 0.1% DMSO 溶剂对照和 10 µM 阿法替尼杀伤对照;每条件至少 6 个技术重复,并开展 2 次独立药物实验。
结果表示为相对于未处理模型的变化,未处理条件设为 0% 变化。负值表示 ATP 活力下降;研究用给药组与未处理组的相对差异,比较不同来源模型的药物反应。
铂敏感性总体保留,紫杉醇反应存在差别
2 名铂敏感患者的直接模型和移植瘤来源模型,在单药及组合条件下均出现明显活力下降。组合处理的下降通常较大,整体与患者临床铂敏感状态相符。
2 名铂耐药患者的模型对卡铂反应较弱。其中患者 2 的直接模型在紫杉醇单药下出现小幅下降,移植瘤腹水模型反应较弱;实体瘤来源模型则在紫杉醇及组合条件下出现下降。
同一患者不同模型的差别提示,取材与扩增过程中可能保留不同肿瘤细胞群。患者 20 的移植瘤模型对卡铂单药也较直接模型弱,作者将其与培养或移植选择及肿瘤异质性联系。
铂难治患者 1 的 3 类模型,对卡铂、紫杉醇及组合均没有明显活力下降。研究因此既报告了与临床分类的总体对应,也保留了单药和取材来源造成的差别。
持续材料来源与短期药筛的组合
作者认为,PDXO 可用于先筛选候选治疗,再选择相应移植瘤开展体内实验。移植瘤材料可扩增和冻存,便于同一患者来源的肿瘤在多批药物研究中重复使用。
这组比较仅覆盖 5 名患者和短期化疗反应。模型仍缺少完整肿瘤微环境,72 小时药筛也没有呈现长期耐药演变;作者计划增加免疫与基质组成,并再在移植瘤中检验候选治疗。