患者来源模型重现沉积，但未出现明显感光细胞丢失
德国图宾根大学等机构与美国 REGENXBIO 团队在 Cell Reports Medicine 报道神经元蜡样脂褐质沉积症 2 型（CLN2）的视网膜模型。该疾病与三肽基肽酶 1（tripeptidyl peptidase 1，TPP1）缺陷有关，患者可出现视网膜退化。研究使用 2 位患者的诱导多能干细胞（iPSC）建立视网膜类器官，并与健康来源模型比较。
患者模型中，TPP1 蛋白降低，线粒体三磷酸腺苷（ATP）合酶 C 亚基（SCMAS）逐渐在溶酶体中积累。培养第 200 天，2 个患者模型的 SCMAS 信号分别约为对照的 5.2 倍和 3.3 倍；至第 350 天约为 7.5 倍和 4.5 倍。
即使培养至第 350 天，类器官仍未表现出明显的感光细胞丢失。脂质积累也存在模型差异，其中 1 个患者模型显著增加，另 1 个未达到显著性。该模型更适合观察早期细胞内沉积与治疗反应。
早期给药与晚期给药的沉积物反应不同
团队用携带人 TPP1 的腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）载体 AAV9.hCLN2 给药。离芯片培养的类器官采用每个类器官 5 × 10⁹、5 × 10¹⁰ 或 1.67 × 10¹¹ 个病毒基因组的剂量。给药时间分别选在沉积形成前、第 123 天或较晚的第 260 天。
在较年轻的模型中，中剂量可使 TPP1 表达恢复至对照水平；第 260 天模型在相同剂量下约恢复到对照的 55%。较早给药可预防 SCMAS 积累，已经开始积累的模型则随剂量增加而减少沉积。
较晚给药也降低了 SCMAS 信号，但未完全恢复到对照水平。研究因此同时观察蛋白表达和既有沉积物的变化，显示同一递送方案在不同疾病阶段产生不同反应。
视网膜芯片加入色素上皮与持续灌流
视网膜芯片将第 123 天类器官放在视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium，RPE）上方，并以 40 μL/h 持续灌流。组织室中使用透明质酸凝胶维持类器官与上皮接触，培养和给药环境由此增加了组织界面及流动因素。
芯片给药为每孔 6.5 × 10⁹、6.5 × 10¹⁰ 或约 2.17 × 10¹¹ 个病毒基因组，按增加的 RPE 细胞调整剂量，观察 28 天。离芯片对应实验观察 35 天。芯片最低剂量已使 TPP1 高于健康对照的 2 倍，并将 SCMAS 降至接近对照水平。
培养液中的 TPP1 蛋白在芯片最低剂量组已达到各自健康对照的至少 100 倍，离芯片最低剂量约为各自对照的 2 倍。作者分别使用两种培养环境的对照作归一化，这 2 个倍数描述的是各自的恢复幅度。
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小体积培养有帮助，RPE 贡献仍需进一步拆分
为研究差异来源，团队另将类器官放入与芯片组织室体积接近的 384 孔板，比较 14 天的表达。小体积培养也促进递送，但芯片的 TPP1 表达仍较高，提示组织环境与培养方式可能共同影响载体作用。
预先只转导 RPE、再加入未转导类器官的实验，没有在类器官中检测到 TPP1 恢复。作者提出 RPE 可能参与芯片环境下的治疗增强，但此次实验尚未证明 RPE 向类器官供给 TPP1 是主要原因。
当前模型支持细胞层面的剂量与时机比较
类器官、RPE 和芯片为同一种基因递送提供了不同层次的比较：既可观察沉积形成前的预防，也可观察已有沉积的减少。研究主要结果来自 2 个患者细胞模型及各自的类器官重复。
模型没有完整的免疫组成，也未重现患者明显的感光细胞退化。作者提出后续加入免疫细胞、延长培养并研究眼内递送；当前结果限于体外 TPP1 表达与组织病理指标。