实验室工作台上的仪器与耗材。
实验室工作台上的仪器与耗材。(Mateus S. Figueiredo / Wikimedia Commons;CC BY-SA 4.0)

比较三维心肌组织在不同氧条件下的反应

亚利桑那州立大学(Arizona State University)等团队在 Biomaterials 报道一种心肌缺血研究芯片,将人干细胞来源心肌细胞与心脏成纤维细胞按 4∶1 的起始比例包埋,形成沿长轴排列的三维组织。

组织培养 13 天后,研究比较 21%、5% 和 1% 氧条件下的 24 小时反应。团队用二维细胞中的低氧荧光探针信号与芯片氧扩散模拟核对实验条件,并记录组织结构、细胞活力和收缩视频。

本项实验中的组织采用静态培养;芯片结构保留了后续接入流动培养的可能性。不同氧条件因此在同一种组织和测量体系下比较。

低氧先改变纤维化标志与节律

低氧处理 24 小时后,各组活细胞比例约为 88% 至 90%,差异未达到统计学显著,组织排列也未出现明显改变。

三维低氧组织中的 α-平滑肌肌动蛋白表达升高,二维共培养未出现相同变化。培养液乳酸增加,说明低氧期间组织代谢也发生改变。

视频分析显示,低氧组织的相邻收缩间隔更不稳定,而平均搏动频率没有显著改变。节律波动与细胞存活因此提供了不同的损伤信息。

复氧后细胞死亡增加,节律仍有波动

研究随后更换新培养液并恢复 21% 氧,比较复氧 1 小时和 24 小时的组织。此前经历低氧的组织中,核染色所测的死亡细胞比例升高。

复氧 24 小时后,部分缺氧相关基因表达和培养液乳酸恢复到接近参照的状态,但收缩间隔不稳定仍然存在。

另一次延长培养且不换液的比较中,不同氧组均出现额外死亡。作者讨论了营养供应和氧条件共同影响结果的可能性。

模型把组织功能与分子反应放在同一条件下观察

这项研究验证了低氧及复氧下的人源三维组织反应,为缺血相关疾病模型和后续药物干预研究提供测量基础;论文未在该实验中比较治疗药物。

作者提出继续结合流动培养、氧梯度和其他细胞组分,并在更复杂环境下分析缺血损伤。当前主要结论来自特定细胞来源和短期氧处理。

来源与延伸阅读

  1. Cardiac ischemia on-a-chip to investigate cellular and molecular response of myocardial tissue under hypoxia. Biomaterials. 2021. doi:10.1016/j.biomaterials.2021.121336 ↗