3 类人源细胞组装成脊髓微组织
运动神经元损伤与周围胶质细胞的炎症反应相互联系。美国牵头团队在 Stem Cell Reports 报道一种脊髓微组织体系，用肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）患者细胞筛选既有药物，再分别验证炎症指标与神经元存活。
研究纳入 2 名携带 C9orf72 重复扩增的 ALS 患者来源细胞、2 个年龄和性别匹配的健康背景，以及 2 个纠正重复扩增的同遗传背景克隆。各类细胞从诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）分化获得。
每个微组织由 4,500 个运动神经元、1,500 个星形胶质细胞和 1,500 个小胶质细胞组成，总数 7,500 个。解离后的细胞按 3∶1∶1 比例在低吸附 V 形 96 孔板中重新聚集。
组织形成后可分别识别运动神经元和两类胶质细胞。患者背景的微组织释放更多白细胞介素 6 与白细胞介素 8（interleukin-6/8，IL-6/IL-8），纠正背景和健康背景则提供相应对照。
190 种药物初筛，以炎症因子选择候选
团队使用包含 190 种 FDA 已批准药物的文库，每种药物按 5 μM 处理 72 小时。初筛同时比较三类细胞微组织和仅由小胶质细胞组成的球状体，随后测培养上清的 IL-6 与 IL-8。
每种候选药物初筛使用单孔，阳性、阴性与溶剂对照各设 3 个重复。组织直径用于观察明显的组织损伤；降低炎症因子的候选再进入后续独立验证。
两种体系产生的候选清单不同：微组织中，24 种药物降低 IL-8，23 种降低 IL-6；小胶质细胞球状体中，对应数量为 45 和 66。不同指标的清单存在重叠。
替米沙坦在初筛中使 IL-8 降低约 65%，IL-6 降低约 50%。团队还选用缬沙坦和阿齐沙坦进行复测，在 2 个患者细胞系、独立分化及重复孔中确认反应。
替米沙坦的抗炎作用随细胞背景改变
替米沙坦在患者脊髓微组织中降低 IL-6 与 IL-8，在健康及纠正背景中没有同样显著的降低。扩展的细胞因子分析中，除 TNF-α 外，多数其他指标未显示显著变化。
这些结果把药物反应与患者细胞背景联系起来。作者仍把其作用途径视为后续研究问题：本研究没有直接证明血管紧张素Ⅱ受体介导了观察到的神经保护。
二维培养直接跟踪运动神经元存活
为了连续记录细胞数量，团队另用带荧光标记的野生型人胚胎干细胞分化的运动神经元，与患者或对照来源胶质细胞共培养。这一验证中的运动神经元来源与三维患者微组织不同。
体系分别设置运动神经元单独培养、与小胶质细胞共培养，以及加入星形胶质细胞的三类细胞培养。替米沙坦仍为 5 μM，每 4 小时成像一次，连续观察 14 天。
药物提高患者小胶质细胞参与条件下的运动神经元存活，也改善患者三类细胞培养中的存活。运动神经元单独培养、对照小胶质细胞参与或对照三类细胞培养中，药物均未显示显著效果。
第 14 天的上清分析同时显示，患者共培养与三类细胞培养中的 IL-6、IL-8 降低，水平接近对照。活细胞成像与炎症检测在同一培养阶段相互补充。
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三维组织以细胞比例补充验证
团队回到三维微组织，在形成后第 5、7、14 天进行整体染色，分别统计 ISL-1 阳性运动神经元、IBA-1 阳性小胶质细胞与 GFAP 阳性星形胶质细胞。
第 14 天，患者微组织的运动神经元比例低于对照；替米沙坦处理显著提高这一比例。较早阶段的增加较小，健康背景中的比例未随药物显著变化。
作者指出，研究集中于 2 个 C9orf72 背景，候选复测主要覆盖沙坦类药物；未单独建立星形胶质细胞与运动神经元的两类细胞比较。模型组成和观察时间因此是后续扩展的重要条件。