同一终点比较不同刺激时长
阿拉巴马大学伯明翰分校（University of Alabama at Birmingham）的研究团队建立人源皮肤类器官，用持续转化生长因子 β（transforming growth factor β，TGF-β）刺激观察纤维化。模型来自诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC），包含表皮与真皮样区室。
研究在共同实验终点比较未处理、刺激 8 天及刺激 14 天的类器官。随着刺激持续，胶原相关信号、成纤维细胞活化和组织排列发生变化；独立 iPSC 细胞系中也观察到相似方向。这个设计把暴露时长与组织变化对应起来。
患者数据与细胞实验支持 RUNX2 研究线索
单细胞测序和空间免疫分析提示，类器官中的成纤维细胞状态与部分硬皮病患者组织特征相近。RUNX2 在纤维化相关群体中升高，团队随后在成纤维细胞中降低其表达，观察到胶原及肌成纤维细胞相关标志减少。
CUT&RUN 用于测量 RUNX2 在基因组上的结合位置，涉及 RUNX1、LOXL2 等纤维化相关位点。结合位置、转录变化和功能实验彼此补充，各位点的具体调控作用仍需进一步检验。
计算筛选缩小范围，再用原代细胞比较
团队把靶点与表型定量构效关系（quantitative structure–activity relationship，QSAR）结合，对约 11.3 万个可获得化合物进行预测，并从中选择 13 个候选在受刺激的人原代成纤维细胞里比较。F0565-0303 能降低 RUNX2 及相关纤维化蛋白，检测中没有出现相应的凋亡信号。
后续转录分析显示，化合物作用与降低 RUNX2 表达具有部分共同变化。计算结合预测提示可能涉及 CK2α 和 LOXL2，另有体外激酶实验支持部分作用线索；这些结果尚不足以确定全部直接靶点或选择性。
类器官和小鼠的结果需要分别理解
在纤维化类器官中，F0565-0303 降低了两个独立 iPSC 系模型的 RUNX2 信号。博来霉素小鼠模型则用于观察真皮厚度、胶原沉积和相关蛋白变化，报告方向一致的改善。类器官中的分子指标与小鼠组织学结果属于不同层级，不能合并成同一种疗效测量。
这项预印本展示了从人源组织模型分析细胞状态、再结合计算筛选和药理比较的研究路径。作者指出，当前模型对免疫和血管相关作用的呈现仍不充分；候选物也仍需进一步验证作用特异性和安全性。