患者脊髓与 iPSC 运动神经元相互参照
肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）具有多种遗传背景，候选干预需要检查哪些变化能在不同患者模型中重复出现。德国、英国和法国团队将人脊髓突触蛋白资料与患者来源运动神经元模型整合，再用二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）检验部分异常是否可以改善。
颈段脊髓组织部分纳入 30 名供者：10 名对照、10 名携带 C9orf72 重复扩增的 ALS 患者，以及 10 名具有 TDP-43 病理的散发性 ALS 患者。团队分离富含突触的组分，用质谱分析其中的蛋白变化。
组织蛋白分析先检查样品是否确实富集突触成分：突触前后蛋白在分离部分增加，核相关标志减少。团队还用蛋白印迹测得的变化与质谱结果比较，确认增加、下降和相对不变的指标都能在两种检测中对应。
体外部分使用人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）分化的运动神经元。初始突触组学包括 4 类 ALS 相关基因背景，每类 2 条患者细胞系，另有 4 条对照。研究在体外培养约 6 周后比较突触蛋白。
不同来源共有突触前相关变化
人脊髓组织的两类 ALS 组显示较多相同方向的蛋白变化。下降蛋白涉及神经递质释放、突触囊泡及线粒体过程；研究再用突触功能数据库检查这些蛋白在细胞中的位置和相关作用。
患者 iPSC 运动神经元也出现突触前囊泡释放相关蛋白下降，部分结果以蛋白印迹复核。模型与人组织共有这一变化，同时两者仍在整体组学分析中分开：培养细胞较幼稚，人组织包含较复杂的细胞及疾病状态。
团队进一步在 C9orf72 子组中比较人组织和体外资料，降低多种遗传背景混合带来的干扰。结果仍突出突触囊泡相关变化，使这一小区室成为后续干预评价的重点。
这项整合比较并未消除所有患者差异。各基因背景仍有不同蛋白和过程变化；作者主要寻找跨背景重复的特征，并保留各基因背景的变化。
磷酸化分析增加应激指标
研究另检查蛋白磷酸化，比较部分 ALS 基因背景及健康运动神经元。分析显示神经结构、突触信号及细胞应激相关变化，随后用成像检查转录因子 c-Jun 的磷酸化状态。
计算分析先依据磷酸化位置推测可能涉及的激酶及其靶标，其中 c-Jun 相关位点较突出。随后，研究以免疫检测确认相关活化增加。这个设计把组学中的候选线索与实际细胞检测分开，用后者检查前者提出的方向。
不同患者细胞系的磷酸化 c-Jun 较高，并伴随乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）外泄等细胞损伤指标。作者将其与突触异常及蛋白稳态讨论联系起来，作为候选干预的另一组检测终点。
突触蛋白、应激信号和细胞存活用于评价反应的不同层面。前者显示局部蛋白组成，c-Jun 提供应激相关状态，存活及 LDH 则反映细胞损伤；多项结果可以检查变化是否同时出现在不同层面。
DHA 在 12 条患者细胞系中改善部分表型
作者选择 DHA，是因为它与神经细胞膜和轴突相关过程有关。团队先在对照细胞检查反应，观察到突触蛋白 synaptophysin（SYP）增加，c-Jun 活化没有同样增加；随后在更广的患者细胞系集合中继续测试。
干预实验以 100 μM DHA 处理 3 周，覆盖分化第 21–42 天，并与相应溶剂对照比较。图中纳入 12 条家族性 ALS 细胞系，每条细胞系有 3 次独立处理。这个阶段的细胞集合比初始突触组学更广，包含多个 ALS 相关基因背景。
处理后，各细胞系的 SYP 染色强度增加，磷酸化 c-Jun 减少，MAP2 阳性神经元计数增加。LDH 外泄及部分凋亡相关基因也下降，支持多个终点呈现同向改善。
不同细胞系的改善幅度仍有差异。作者用这些结果展示，在遗传背景不一致的模型中，可以围绕共有的突触异常检验候选干预；它提供的是细胞实验的概念验证。
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临床关联与模型成熟度仍有具体限制
人组织在质谱前按组混合，便于突出共同变化，却无法逐个检验蛋白水平与患者病程或病理程度的关系。体外细胞又来自另一批患者，尚未与对应组织逐人匹配；研究没有散发性 ALS 体外细胞的完全匹配数据。
iPSC 运动神经元的突触状态较早期，但其多项变化能与人脊髓资料对应。研究由此提出以突触微环境作为后续治疗策略的研究方向。DHA 的结果仍来自限定培养和暴露条件，尚未构成人体疗效证据。