患者细胞药筛提出的候选进入一期试验
2022 年 10 月 25 日，京都大学（Kyoto University）等机构在 eClinicalMedicine 报告了名为 iDReAM 的一期研究。研究以博舒替尼在肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）患者中的安全性和耐受性为主要问题，同时利用参与者来源细胞，分析不同临床分组的神经元分子特征。
论文介绍，博舒替尼此前由患者来源诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）的药物再利用筛选提出。早期工作以运动神经元存活和异常蛋白积累为观察对象，将 Src/c-Abl 通路列为候选靶点。本次试验把这一候选推进到患者研究。
试验在日本 4 家医院开展，共有 13 人接受博舒替尼，探索性功能分析集中于完成 12 周治疗的 9 人。研究采用开放标签设计，在治疗前另设 12 周观察期，用每位患者前后两个时期的变化进行比较。
临床功能变化与神经丝水平的关系
研究者记录修订版 ALS 功能评分量表（Revised Amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale，ALSFRS-R）的变化。在完成治疗的 9 人中，5 人在治疗期的评分下降幅度小于观察期。这个比较反映各自病程速度的变化，是研究的探索性结果。
事后分析发现，这一组患者治疗前的血浆神经丝轻链（neurofilament light chain，NFL）较低。按基线 NFL 低于 100 pg/mL 和不低于该值分组后，低水平组有 5 人，高水平组有 4 人；两组治疗期的功能评分变化也有差别。
另一个神经损伤指标——磷酸化神经丝重链（phosphorylated neurofilament heavy chain，pNFH）——未显示同样的组间差异。基线 NFL 与治疗前观察期的评分变化也未发现关联。
9 名患者与 6 名健康供者的神经元比较
为了解高、低 NFL 分组是否伴随不同的神经元状态，团队利用患者血细胞建立 iPSC，再获得运动神经元。健康对照来自 6 名没有神经系统症状或相关家族史的供者。
细胞分析覆盖上述 9 名患者，其中低 NFL 组 5 人、高 NFL 组 4 人。研究通过单细胞 RNA 测序比较运动神经元的基因表达，先观察 ALS 患者与健康供者的差别，再分析两类患者之间的差别。
4 个基因显示高、低 NFL 组的表达差异
患者运动神经元的通路分析显示了与 ALS 病理相关的分子特征。继续比较高、低 NFL 组后，研究者发现两组存在不同的表达模式，并用拟时序分析观察神经元状态的差异。
团队从患者与健康供者之间存在差异的基因中，进一步找出 MEG3、NKX6-2、TEAD1 和 TFAP2A。这 4 个基因在高、低 NFL 患者的神经元中也表现出表达差异。作者据此讨论临床神经丝分组可能对应不同的疾病分子背景。
作者提出，区分两组的基因和通路既可能反映 NFL 水平背后的疾病过程，也可能为后续增强候选药物作用的研究提供线索。这些解释来自本次患者分组与细胞表达的探索性比较。
事后分组仍需结合试验设计解释
低基线 NFL 本来就可能与较慢的功能下降有关，因此，本次观察到的分组差异还受到疾病自然进程的影响。研究没有安慰剂组，入组人数少、观察时间短；功能评分的重复测量模型和 NFL 分组分析均为事后分析。
在本次安全性评价中，每日 100–300 mg 的三个剂量组未观察到剂量限制性毒性，每日 400 mg 组的 3 人均因相关不良事件停止治疗。作者把本次研究定位为一期安全性及探索性反应研究，并提出继续积累病例和实验室资料，检验患者分层的价值。