微孔融合让血管和免疫细胞进入视网膜模型
常规视网膜类器官缺少血管和驻留免疫细胞，限制了对血管病变及治疗干预的研究。暨南大学（Jinan University）、香港中文大学（The Chinese University of Hong Kong）等团队在 Science Advances 报告，用聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS）微孔把人源血管类器官与视网膜类器官融合，建立同时含血管结构和小胶质细胞的模型。
研究使用 3 条独立诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）系。融合时，将第 60 天的视网膜类器官置于第 5 天血管类器官上方，约 1 周后逐渐融合，再转入低黏附培养板长期培养。微孔用于定位和融合，随后进行静态共培养。
PDMS 微孔还用于减少血管类器官大小的波动。主文报告，直径变异系数在 PDMS 微孔约为 11.98，在普通 6 孔板约为 39.65；与 96 孔 V 底板约 7.32 相比则无显著差异。选择 PDMS 平台的另一原因，是其较浅的微孔便于在显微镜下调整融合位置。
共培养 30 天后，融合模型中央可见 CD31 阳性管状结构，外有周细胞。10 个类器官中每个测量 2–4 条血管，直径为 6.36±1.51 μm。单独培养的视网膜类器官未见相应血管结构。共培养 120 天、即视网膜发育总计 180 天时，模型仍保留血管和视杆、视锥细胞。
抑制剂对照确认血管类器官中的小胶质细胞
团队先在血管类器官中检查小胶质细胞身份。第 23 天加入 2 μM 集落刺激因子 1 受体抑制剂 PLX5622，处理 7 天后，IBA1 阳性细胞密度由二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）对照的 531.5±167.0 个/mm²降至 22.15±7.98 个/mm²；图注标示的样本量为 6–9 个类器官。
血管类器官接受脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，TNF-α、IL-8 及 AIF1 表达上升；PLX5622 处理组的 TNF-α和 IL-8 表达较低，支持小胶质细胞参与这一炎症反应。另一项有无 VEGF-A 的比较中，两组都出现小胶质细胞，AIF1 表达差异不显著，说明在本研究条件下，两组都能形成小胶质细胞。
PLX5622 在这里作为模型组分验证的药理对照，帮助确认血管类器官中的小胶质细胞及其对炎症反应的贡献。融合后的视网膜模型另行接受炎症刺激，用于检查加入血管与免疫组分后的反应。
融合后的模型同时上调促炎与抗炎标志
融合后，小胶质细胞从血管类器官迁入视网膜模型，呈现分支形态。第 90 天的融合模型与单独视网膜类器官接受相同 LPS 刺激 72 小时后，融合模型的 TNF-α、IL-8 等促炎基因，以及 IL-10、IL-13 等抗炎基因表达更高，显示加入免疫组分后能检测到不同的炎症反应。
转录组比较也支持模型组分发生变化：共培养 30 天的融合模型相对单独视网膜类器官，有 736 个基因上调、102 个下调，血管生成和免疫反应相关过程富集。解释这类整体表达差异时，也需要考虑新增细胞组分的影响，并结合具体细胞和功能指标。
屏障结构已经出现，通透功能仍待检验
融合模型的血管结构表达紧密连接蛋白 Claudin-5，不表达血管窗孔标志 PLVAP；周细胞和小胶质细胞也分布在血管周围。在 7 个类器官的荧光定量中，融合模型的 Claudin-5 信号高于血管类器官。这些结果支持其具有类似内血–视网膜屏障的细胞组成和结构。
本文尚未测量屏障通透性，也没有证明血管能承担灌流。作者把灌流培养列为后续工作。因此，该模型当前的价值，是把视网膜、血管和免疫组分放到同一体系，为后续血管病变和治疗干预研究提供更完整的观察对象。