2 位儿童供者形成长期肝细胞球状体
大麻二酚（CBD）与丙戊酸可能在抗癫痫治疗中同时使用，肝细胞如何响应这一组合值得具体检查。美国北卡罗来纳大学团队在 Toxicology in Vitro 报告，以儿童供者原代肝细胞构建三维球状体，比较单药和组合条件下的细胞状态、尿素生成与代谢变化。
肝细胞来自 2 位男性儿童供者，年龄分别为 10 岁和 6 岁。模型每孔约 1,500 个肝细胞，在 384 孔低吸附板中培养；第 6 天开始给药，此后每 48–72 小时更换约 60% 培养液并补充药物，总培养延长至 21 天。
测量安排在开始给药后 24 小时、8 天和 15 天。CBD 浓度覆盖 2–200 μM，组合中丙戊酸为 0.5、1 和 10 mM，并设相应溶剂及单药参照。总培养 21 天与药物暴露 15 天分别描述培养和处理时长。
ATP 响应随浓度、时长和供者改变
团队用细胞内三磷酸腺苷（ATP）作为细胞状态指标，并与相同时点的溶剂对照比较。10 岁供者模型在 24 小时没有明显 ATP 下降；到第 8 和第 15 天，较低 CBD 浓度可使 ATP 信号增加，100–200 μM 则出现明显下降。合用丙戊酸削弱了部分较低浓度 CBD 条件下的 ATP 增加。
6 岁供者反应更敏感。第 8 天，50 μM CBD 与 0.5 或 1 mM 丙戊酸合用时，ATP 明显下降；到第 15 天，50–200 μM CBD 单用及部分组合均已造成严重 ATP 损失。该供者的组合差异与另 1 位供者并不相同。
这些组合结果支持部分条件下损伤增强。作者同时指出，当前实验没有证明组合毒性超过各单药效应按加和预期得到的程度，因此没有据此确认协同作用。ATP 曲线还随培养时长变化，比较均采用同一时点对照。
尿素与药物代谢显示另一组供者差异
10 岁供者模型中，CBD 随浓度和时间增加使尿素生成下降，部分组合进一步增强这一变化，尤其是 10 mM 丙戊酸与较低浓度 CBD 合用。6 岁供者中，CBD 对尿素的影响较小，10 mM 丙戊酸在较长暴露后使尿素约降至对照的一半，合用 CBD 没有再出现同样明显的额外下降。
研究还测量 CBD 的羟基、羧基及葡萄糖醛酸结合产物，以及丙戊酸的葡萄糖醛酸结合产物。部分 CBD 代谢物在第 8 天较高，第 15 天下滑；丙戊酸结合产物也随 CBD 浓度增加而减少。培养中的细胞损伤会影响代谢物生成，因此这些变化同时反映处理和细胞状态。
合样代谢组用于寻找变化线索
非靶向代谢组只采用 10 岁供者模型。每个条件将 6 个球状体及相应培养液汇成 1 个样品，并对该合样进行 3 次质谱技术进样。扣除背景后，团队保留约 5,664 个特征用于比较。
第 8 天的 50 μM CBD、1 mM 丙戊酸及合用条件中，类固醇合成和嘧啶代谢相关特征发生变化。部分注释代谢物提示皮质醇、可的松等成分改变，为后续检验提供线索；这一探索分析没有直接确定细胞损伤由哪条代谢途径造成。
当前模型仅覆盖 2 位儿童肝细胞供者，组合效应需要连同浓度、时长和功能指标解释。培养中的蛋白结合及细胞内实际药物浓度也没有在本研究中测定，标称培养液浓度与患者肝脏暴露之间还需进一步建立联系。