膜片钳电生理实验设备。
膜片钳电生理实验设备。(Романов Артур / Wikimedia Commons;CC BY 4.0)

5 种阳性对照采用同一膜片钳方案

药物对 hERG 钾通道的抑制,是心脏安全性评价中的一项常用指标。FDA 等团队依据国际人用药品注册技术协调会(International Council for Harmonisation,ICH)E14/S7B 问答文件的实验建议,研究温度和药物损失对阳性对照检测的影响,结果发表于 Journal of Pharmacology and Toxicology Methods。

团队测试了西沙必利、多非利特、特非那定、索他洛尔及研究用化合物 E4031。实验采用人工全细胞膜片钳、近似动作电位的电压方案和 0.2 Hz 刺激频率,比较室温与接近生理温度的记录条件。

温度响应与非特异性吸附分别检验

记录温度改变了 E4031、特非那定和索他洛尔的 hERG 抑制效力;西沙必利和多非利特没有同样的温度效应。另一个问题出现在药物浓度上:西沙必利和特非那定会因实验装置的非特异性吸附而明显损失。

研究分别测量真实膜片钳实验和采用相同条件的平行实验中的药物浓度,再计算抑制效力。两种取样方式所得结果相近。作者据此提出,当浓度损失主要来自非特异性吸附时,平行实验可用于核查实际暴露浓度。

来源与延伸阅读

  1. hERG block potencies for 5 positive control drugs obtained per ICH E14/S7B Q&As best practices: Impact of recording temperature and drug loss. Journal of Pharmacology and Toxicology Methods. 2022. doi:10.1016/j.vascn.2022.107193 ↗