从原组织出发保留细胞间联系
2025 年 7 月，Bioactive Materials 发表 GlioME 胶质瘤类器官研究。团队希望在培养肿瘤细胞的同时，使模型保留更多患者原组织的免疫细胞及其他组成，用于研究药物作用。研究比较同一材料采用两种培养方法后的变化。
GlioME 从保留局部细胞联系的肿瘤组织片段建立，使用基质支持培养。配对比较为悬浮培养的肿瘤组织片段，两种方法均避免完全分散为单细胞；研究重点是比较培养后保留的组织及免疫组成。
研究从 34 名患者的材料中成功建立 30 例 GlioME，配对悬浮方法成功 26 例。样本包含不同胶质瘤类型、等级、IDH 状态及初次和复发肿瘤。培养 1–2 周后形成较稳定结构，部分 GlioME 沿基质伸展，呈现侵袭样生长形态。
与原肿瘤进行组织和分子特征比较
团队比较培养 2 周的类器官与原肿瘤染色，观察细胞形态、IDH 和胶质纤维酸性蛋白等指标。两种模型保留部分原肿瘤特征，但在某些 IDH 突变样本中表现不同。作者认为，这可能与不同培养条件下各类细胞的增殖速度不同有关。
分子层面使用整体转录组、全外显子测序和 DNA 甲基化分析。各项分析的样本数分别为：转录组来自 6 名患者，外显子来自 4 名，甲基化来自 5 名。模型与对应肿瘤在表达和遗传特征上具有相似性，研究同时记录了培养后仍存在的差别。
转录组聚类中，同一患者的原肿瘤与类器官更为接近。GlioME 保留多数原肿瘤的拷贝数变异，突变谱相似度约为 76.7%；甲基化分析中，同一患者及同一亚型的样本也具有较高相似性。
两种模型还保留了 CD31 阳性的内皮细胞，Ki-67 染色显示培养 2 周后仍有较多增殖细胞。团队也比较了不同胶质瘤类型的类器官在培养 1 周和 2 周时的尺寸变化。
内皮细胞的保留有结构限制。作者在讨论中指出，模型缺少体内血液循环，血管腔会塌陷，留下内皮细胞；后续仍需改善血管结构和功能的维持。
原有免疫细胞是两种方法的重要差别
转录组反卷积分析首先检查肿瘤相关巨噬细胞等组成，随后用免疫荧光和流式细胞术测量。培养 2 周后，GlioME 保留的巨噬细胞多于配对悬浮类器官。在 10 名患者的比较中，相关 CD45、CD68 阳性细胞数量约为悬浮方法的 2 倍。
团队也比较 T 细胞相关表达和 CD4、CD8 等细胞。GlioME 中的部分相关表达更接近原肿瘤，组织染色及流式结果支持原有 T 细胞的保留。这些 T 细胞来自肿瘤材料本身。
论文验证的稳定观察期为至少 2 周。作者认为，肿瘤组织活性、取材区域和运输时间会影响建模成功率，培养条件也可能改变不同细胞群体的比例；长期微环境变化仍是计划研究的内容。
不同药物采用不同的评价指标
针对巨噬细胞的测试使用 CSF1R 抑制剂 pexidartinib。处理后巨噬细胞染色和 CD206 阳性巨噬细胞比例下降，提供了保留原有免疫组成后可测量的药物效应。
替莫唑胺实验观察细胞存活、死亡和剂量响应，部分悬浮类器官在处理后大体形态仍保持，却已有活性变化。三维活性测量与 CCK-8 比色法在本次同一患者样本比较中的相关系数为 0.94。
随后 6 名患者的 GlioME 接受替莫唑胺和 MET 抑制剂 vebreltinib 的响应测试，模型之间出现差异。
1 例 MET 扩增患者的模型测试与随访
1 名复发性、IDH 突变 WHO 4 级星形细胞瘤患者的 GlioME 对 vebreltinib 比替莫唑胺更敏感。患者随后接受该药治疗；论文报告随访 MRI 中残余强化病灶消失、T2 FLAIR 病灶减小并伴症状缓解。荧光原位杂交检出 MET 扩增，为这一个案的响应提供分子线索。
作者计划进一步研究培养过程中肿瘤微环境的变化，考察 T 细胞、巨噬细胞参与肿瘤杀伤的作用，以及它们对不同治疗的反应。