以肌钙蛋白 I 亚型变化筛选促进心肌成熟的化合物
人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）来源心肌细胞能够用于疾病和药物研究，但细胞常保留较早发育阶段的特征。京都大学（Kyoto University）与武田制药（Takeda Pharmaceutical Company Limited）等团队在 Nature Communications 建立成熟表型筛选，寻找可提高模型结构与功能成熟程度的化合物。
筛选依据是肌钙蛋白 I 亚型从较早阶段的 TNNI1 向心肌型 TNNI3 转换。双荧光报告细胞使团队能够观察 TNNI3 表达升高，并从心肌分化过程中过滤成熟程度不同的细胞群。
9,048 种化合物按 3 μM 初筛，先获得 387 个候选，再根据重复性、浓度关系、细胞形态和 TNNI3 的 RNA 表达缩至 8 个。团队选择 T112 与 T623 深入比较：前者激活雌激素相关受体 γ（estrogen-related receptor gamma，ERRγ），后者抑制 S 期激酶相关蛋白 2（S-phase kinase-associated protein 2，SKP2）。
时间与浓度决定成熟指标和细胞状态
在分化第 8–16 天加入 3 μM T112，或第 10–16 天加入 40 nM T623，TNNI3 阳性比例分别约为 60.6% 与 42.9%，溶剂对照约为 10.3%。组合处理升至约 86.5%。更早或更高浓度处理虽增加报告信号，也伴随严重细胞损伤，因此未选为后续条件。
RNA 测序显示，两种化合物和组合处理改变的基因集合有所不同。组合对肌原纤维、线粒体呼吸链等成熟相关组成的影响更广。与公开成人心室心肌资料比较，处理后的细胞朝成熟方向变化，但转录状态仍与成人心肌有差距。
T112 的效果覆盖代谢、收缩和横小管
氧耗分析显示，T112 与组合组的基础及最大呼吸、ATP 生成提高。TNNI3/TNNI1 蛋白比例增加，细胞面积扩大，肌节变长，形态趋于细长。在另外两条 iPSC 系中，线粒体、肌钙蛋白亚型和部分功能测量也观察到相应变化。
视频运动分析发现，T112 和组合处理提高收缩、舒张及最大传导速度。膜片钳记录显示动作电位幅度和最大上升速度增大，最大舒张电位则没有显著差别。
电子显微镜在 T112 与组合组观察到横小管和较有序的肌节超微结构。横小管参与心肌细胞内的兴奋与收缩耦联，是本研究的重要结构结果；对照与 T623 单药组没有观察到同样的横小管形成。
T623 可提高早期 TNNI3 表达和肌节长度，但没有同样提高线粒体活性、细胞面积或形成横小管。肌钙蛋白亚型变化用于初筛，代谢、收缩、电生理和超微结构测量进一步区分了两种化合物的作用。
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受体缺失比较检验 T112 的作用依赖
在缺失 ERRγ 的既有细胞模型中，T112 未能继续提高 TNNI3 表达，ATP 生成和氧耗也没有相同提升。T623 对报告信号的作用仍然存在。团队结合这一比较，将 T112 的主要成熟作用归于 ERRγ 相关通路。
作者认为，T112 处理后的细胞具有接近新生期心肌的部分成熟特征。研究提供了化合物促进成熟与多指标质量评价的方案，后续用途包括疾病建模和药物筛选；本次实际验证集中在报告信号、代谢、收缩、电活动与结构。