非动物方法可以在不同监管用途下被接受
欧洲药品管理局（European Medicines Agency，EMA）于 2017 年 2 月公开一份指南，说明药物研发和生产质量控制中如何接受符合 3Rs 原则的试验方法。3Rs 指替代（replacement）、减少（reduction）和优化（refinement）动物试验。文件在 2016 年 12 月由人用药品委员会（Committee for Medicinal Products for Human Use，CHMP）通过，取代 1997 年的体外方法替代动物研究立场文件；适用范围同时包括人用药和兽药。
其中，替代方法包括细胞和组织模型、数学或计算模型等。文件所称监管接受，可以是方法被纳入试验指南或药典，也可以是在具体药品申请中接受其数据。后者的判断围绕特定产品和用途展开，所需证据与面向一类产品的通用方法接受有所区别。
先明确用途，再判断方法需要证明什么
指南要求方法有明确的试验程序和科学合理的评价终点，并说明它与目标生物效应的关系。这里的相关性包含两层问题：方法是否确实测量或预测了关心的效应，以及这些结果是否能用于提出的药物评价任务。与已有、性能明确的方法进行比较，可以成为准确性依据的一部分。
使用情境还要交代方法适用于哪些条件、现有资料能支持到什么范围。新方法可以填补已知信息缺口，也可以提供至少与原方法同样有用的信息。可重复性则涉及采用同一程序时，不同时间能否得到稳定的结果；这些要求需要结合方法用途一起判断。
验证资料的多少取决于方法的新颖程度、原理、既有使用经验，以及计划解决的评价问题。用于探索机制、补充证据或部分替代某项研究的方法，各自需要证明的内容可能不同。文件据此保留了多种证明科学有效性的路径。
正式验证与个案评价提供不同的证据路径
正式验证通常包括候选方法评价、验证前的程序优化与实验室转移、验证研究、独立同行评价，以及对监管用途的建议。指南描述的前瞻性验证会开展至少 3 家实验室参加的盲法研究，按预先规定的性能标准分析结果，以考察方法对具体用途是否相关且可靠。
文件也允许采用分模块的验证思路，把已有资料、回顾性分析和新的研究结合起来。某些方法虽未经过完整的正式验证程序，但已经有充分资料证明科学有效性，仍可由主管机构逐个申请评价。这条路径要求证据足以支持提出的用途。
并行提交新方法数据，用于积累接受依据
对于验证状态尚不足、或者需要确认新使用情境的方法，指南提出可在提交常规研究数据的同时，自愿提交新方法所得资料。两组数据并行产生，有助于评价新方法的性能，并逐步积累验证和用途证据。
按这份指南描述的安排，新方法数据在这一阶段独立评价，不参与当次药品的监管决定，其目的在于支持未来可能的接受。即使某项方法已经在另一个用途下经过正式验证，改变评价问题后，也可能需要补充相应的使用情境资料。
资格意见、资格建议和个别申请的接受范围不同
人用药物研发的新方法可申请 EMA 的科学咨询和新方法资格认定，由相关评价团队审查提交资料。文件区分资格意见与资格建议：前者就特定用途下的方法可接受性形成意见，后者可指导后续需要开展的研究。最终资格意见形成前，可与申请人商定进行公开咨询。
评价结果也可能要求继续积累实际使用数据，或认为现有资料仅足以支持某个药品申请。一个方法在具体产品中有用，进一步推广到其他产品和实验室时，仍需要证明相应的适用范围。指南将这些不同结果分别列出，为体外和计算方法的开发者提供了从研究数据到监管用途的具体路径。