研究比较不同细胞来源的年龄特征
索尔克生物研究所（Salk Institute for Biological Studies）等团队在 Cell Stem Cell 报道了不同年龄供者的人源神经元模型研究。作者比较两条建模途径：先将细胞转为诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）再分化，或直接由成纤维细胞转为诱导神经元（induced neurons，iNs）。他们关注细胞模型能否保留供者年龄特征，因为年龄是晚发神经疾病的重要背景。
研究采集了 19 位 0–89 岁供者的皮肤成纤维细胞，其中 16 株用于建立 iPSC 系。直接转分化神经元的转录分析包括 18 位供者的 22 份样本；部分供者贡献了多份独立转分化样本。
直接转分化神经元保留更多年龄相关表达
研究按低于 40 岁和高于 40 岁对样本分组。原成纤维细胞中检出 78 个年龄相关差异表达基因；iPSC 重编程后，同一分组比较只检出 1 个。
所建 iPSC 仍表现出典型多能性标志，G 带核型检查未见异常。
直接转分化神经元中检出 202 个年龄相关差异表达基因，涉及钙稳态、神经突起及突触可塑性相关过程。其中只有 7 个与成纤维细胞的年龄相关基因重叠，显示不同细胞类型的年龄表达特征并不相同。
为减少残留成纤维细胞对 RNA 测序的干扰，研究者在分析前富集神经元。富集后超过 90% 的人源细胞表达 βIII-tubulin，其中超过 95% 同时表达 hTau。离子通道和突触蛋白表达上升，成纤维细胞及细胞周期相关基因下降。
前额叶组织提供额外参照
团队还分析了 14 份 0–89 岁的人前额叶组织。脑组织与直接转分化神经元共有 49 个年龄相关基因，重叠数约为神经元与成纤维细胞之间的 7 倍。
脑组织、成纤维细胞和直接转分化神经元共有 3 个年龄相关基因，RanBP17 是其中之一。定量 PCR、蛋白质印迹和组织染色均支持 RanBP17 表达随年龄增加而下降；组织染色使用 10 份脑样本。
前额叶组织中的 RNA 来自神经元、胶质、内皮等多类细胞。作者将脑组织作为组织层面参照，与供者来源的细胞进行比较，查看哪些年龄相关变化在不同材料中都能观察到。
年长供者细胞的核与胞质分区减弱
作者用双荧光报告指标观察蛋白在细胞核和细胞质之间的分布。对 16 位供者成纤维细胞的分析显示，年长组更常出现绿色信号进入细胞核、红色信号出现在细胞质的情况；这一指标与供者年龄及 RanBP17 表达相关。
该指标比较细胞核内绿色和红色荧光的相对强度。年长组比值升高，表示核与胞质原有的分布区隔减弱。培养 6 周的直接转分化神经元也出现年龄相关差异，分析覆盖 14 位供者，最高年龄组最明显。
另一种活细胞荧光测量也显示，年长供者成纤维细胞中的报告探针在细胞核与细胞质间穿梭更慢，为这一功能变化提供了另一项观察。
iPSC 来源神经元仍呈较年轻的指标特征
为检查年龄相关表达信号是否会在 iPSC 分化后恢复，作者比较了同一供者子集。在这组数据中，iPSC 来源神经元有 12 个年龄相关差异表达基因，直接转分化神经元有 227 个；这是子集分析，与前文完整队列的 202 个基因不是同一分母。
另一项 iPSC 来源细胞的核与胞质定位比较未见明显年龄组差异。作者据此认为，经过多能状态后，细胞在本研究测量的年龄相关指标上仍呈较年轻的状态。
电生理结果没有显示年龄组差异
来自年轻和年长供者的直接转分化神经元均可检测到钠、钾通道相关电流，并可诱发多个动作电位。涉及 13 位供者的比较未显示明显年龄组差异；转录和核质定位指标则检出了年龄相关变化。
作者认为，iPSC 重编程所伴随的细胞年轻化可能影响晚发神经疾病的体外建模；直接转分化则提供了另一种保留部分供者年龄特征的模型来源。本研究比较的是模型状态和功能，没有筛选治疗候选药物。