让电极接触三维组织表面

心脏类器官可以包含多种细胞,但其球形表面与平面电极之间的接触会影响电生理记录。釜山大学(Pusan National University)等机构的团队在 Advanced Science 报道一种柔性微电极平台,用凹形培养槽承托类器官,使薄膜电极沿组织表面贴合。

研究将这个装置用于健康供者及杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)患者来源的心脏类器官。DMD 患者缺少正常的抗肌萎缩蛋白,心脏受累是疾病的重要表现。团队希望在同一装置中观察组织的自发电活动、机械运动及药物作用。

电极薄膜约 4 μm 厚,设置 6 个记录通道,单个电极直径为 20 μm。凹形槽帮助组织在重力作用下定位,电极由下方接近类器官表面。平台还配合视频采集,在记录细胞外场电位的同时观察不同区域的运动。

心脏类器官柔性微电极平台的结构、组织接触方式与电生理记录
心脏类器官柔性微电极平台的结构、组织接触方式与电生理记录(Ye Seul Kim et al. / Advanced Science, 2026, Fig. 1;CC BY 4.0)窄屏可横向滑动查看完整图表。

4 名供者的类器官呈现不同结构特征

研究所用细胞来自 2 名健康供者和 2 名 DMD 患者。患者的致病变异通过遗传检测确认。诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)经过心脏方向分化形成类器官,组织形成过程没有加入 Matrigel 或其他外源细胞外基质。

类器官包含心肌细胞、成纤维细胞、内皮相关细胞和其他细胞群。团队用单细胞转录组比较其构成,每个供者样本汇集 40 多个类器官,识别出 8 类主要细胞,并进一步分析了心肌细胞的亚群。

DMD 类器官缺少抗肌萎缩蛋白,并呈现较多与胶原和细胞外基质相关的表达变化。部分血管相关特征也发生改变。2 名患者的细胞比例和转录特征各有差异。

两组类器官的心室成熟相关标志仍处于较低水平,保留了发育中组织的特点。

组织空间分布也有差异。健康类器官中的心肌细胞分布较连贯,DMD 来源组织则可见局部聚集和结构片段化。心室、心房和起搏相关细胞具有不同的连接蛋白表达,作者据此讨论组织结构与电活动差异的联系。

场电位与视频同步记录电活动和组织运动

装置可获得约毫伏量级的细胞外信号。团队先进行去噪,再识别去极化和复极相关峰,计算场电位时程等参数。多个电极接触不同区域,能够呈现组织内电活动的空间差异。

视频分析选取局部区域,通过图像灰度随时间的变化追踪组织运动。电信号和运动信号结合后,可观察一次电活动与相应运动是否同步,以及药物处理后节律怎样变化。

研究另用钙荧光检测,比较健康与 DMD 类器官的心肌细胞钙活动。

钙荧光比较中,DMD 类器官的峰上升更快、幅度较高。单细胞资料同时显示钙通道表达降低及心肌亚群差异。

hERG 阻断剂引起复极和节律变化

药理测试使用 E4031,这是一种 hERG 钾通道阻断剂。健康来源类器官在可分析条件下出现场电位时程延长;DMD 来源组织较早出现不稳定活动,随处理增强可见更紊乱的节律。

部分 DMD 记录呈现复极阶段之后的额外电信号。作者将其描述为类似后除极的活动。当复极峰无法可靠识别时,场电位时程也难以计算,因此团队同时查看原始波形、节律和视频,分析药物造成的变化。

1 名患者已有心室肥厚等心脏表现,其来源类器官也显示与结构重塑和电活动异常相关的特征。研究以少数供者为起点,探索患者来源组织能否呈现不同的药物敏感性。

柔性接触平台的后续改进

这一装置的特点是将三维组织定位、柔性电极接触和光学观察整合到同一记录平台。与把类器官压到平面电极上相比,凹形槽和薄膜结构为球形组织提供了另一种接触方式,便于观察相同组织的动态变化。

本研究的药物比较集中于 E4031,供者数量为 2 名健康者和 2 名患者。作者提出继续完善电极与不同形态组织的贴合,开发可伸缩传感阵列,并结合钙信号或收缩力测量,进一步研究电活动与机械运动的关系。

当前平台需要手动放置和调整类器官,限制了记录通量,也可能引入操作者差异。作者建议结合自动定位,并开发能处理 DMD 不规则波形的分析算法。

来源与延伸阅读

  1. Conformable Microelectrode Arrays Integrated with a Scoop‐Shaped Slide‐Well for Dynamic Electrophysiological Profiling of Patient‐Derived Cardiac Organoids. Advanced Science (2026). ↗