32 份手术材料建立类器官和配对移植瘤
研究取得 32 名胆管癌患者的手术肿瘤材料，建立 18 个患者来源类器官（PDO），成功率为 56.3%；另建立 21 个患者来源移植瘤（PDX），成功率为 65.6%。18 个 PDO 包括 12 个肝内、4 个远端和 2 个肝门部胆管癌模型。
类器官能够传至第 10 代，并在冻存后恢复培养；不同模型呈厚壁囊腔、薄壁囊腔或紧密团块等形态。CK7、CK19 和 EPCAM 染色与相应肿瘤的胆道特征相近，Ki67、CEA 和 p53 的染色模式也保留了部分原组织特征。
全外显子测序实际比较 2 名肝内胆管癌患者的肿瘤、PDO 和 PDX。两组配对材料保留大部分肿瘤相关变异及拷贝数变化，显示模型有遗传一致性；这一测序范围仍不足以系统联系整个模型队列的遗传改变与药物反应。
18 个类器官接受 4 种单药的 5 天测试
类器官在检测孔中培养 72 小时后，分别接受吉西他滨、5-氟尿嘧啶、顺铂或奥沙利铂处理 5 天，每个浓度 3 个重复孔。三磷酸腺苷（ATP）发光信号用于拟合剂量反应和半数抑制浓度（IC50），并计算归一化曲线下面积（AUC）。
图示将归一化 AUC 的 0–33%、33–67% 和 67–100% 范围分别称为敏感、中间和低反应。18 个模型的曲线差异明显。例如 pCCA-PDO2 对吉西他滨敏感、对其余 3 药低反应，iCCA-PDO12 对全部 4 药低反应。
研究以 5-氟尿嘧啶测试氟嘧啶类反应。作者说明，类器官缺少充分的卡培他滨代谢过程，因此没有直接用卡培他滨替代这一单药检测。
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2 个配对移植瘤验证部分药物差异
验证选择了 iCCA-P25 和 dCCA-P27 两个配对模型。iCCA-P25 类器官对吉西他滨敏感、对奥沙利铂低反应；对应移植瘤中，吉西他滨显著抑制生长，奥沙利铂抑制较弱。
dCCA-P27 类器官对吉西他滨和 5-氟尿嘧啶都较敏感，对应移植瘤也对两药出现生长抑制，并伴随 Ki67 降低和 TUNEL 凋亡信号增加。该验证支持这 2 个模型和具体单药的方向一致。
7 名术后患者的比较以复发时间分组
临床部分比较 7 名术后接受辅助化疗的患者。作者以术后 17.5 个月内是否复发划分随访组；体外则按相应方案是否包含低反应单药进行归类。有 6 例体外和临床分组相符。这里的随访终点是复发或持续无病，体外检测分别测试单药。
pCCA-P1 和 iCCA-P14 在术后接受吉西他滨加顺铂，论文记录超过 19 个月无复发；对应类器官对吉西他滨敏感、对顺铂处于中间范围。iCCA-P20 接受同方案后 8 个月复发，对应模型对两药低反应。iCCA-P26 接受吉西他滨加奥沙利铂后 6 个月复发，模型对奥沙利铂低反应。
部分病例的 CA19-9 在术后降低，复发时再升高，为随访分组提供了生化信息。研究的临床比较仍只有 7 人，采用了作者指定的复发时间和单药分类规则，尚不足以确定跨患者、跨方案的临床预测表现。
培养未成功的材料占一定比例，可能影响模型对患者群体的代表性。免疫和血管等环境也未在现有 PDO 中重建。作者提出提高建立率、缩短检测周转时间，并加入靶向药和共培养条件，这些属于后续研究方向。