TDP43 变异神经元的 D-sorbitol 轴突运输比较（预印本版本）
在分隔近端与远端轴突的培养腔中，追踪线粒体/溶酶体形态、速度和位移，并比较 D-山梨醇（D-sorbitol）处理。
用途与模型
- 研究用途
- 检验人源 TDP43 变异神经元的细胞器运输表型及其小分子反应，为聚集之外的干预终点提供实验参照。
- 模型与细胞来源
- TAR DNA 结合蛋白 43（TAR DNA-binding protein 43，TDP43）S393L 与 G294V 患者诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）来源运动神经元，设健康供者对照。
- 方法版本
- 2017 年 11 月 13 日 bioRxiv 预印本实验版本，未同行评议
- 实验形式
- 定向微流控培养腔分开轴突近/远端；成熟后期 40 mM D-sorbitol 处理 24 小时，活细胞成像追踪。
材料与平台
- 人源模型与分区
- 2 种患者变异模型与正常对照；比较较早和较晚成熟状态的近端、远端轴突。
- 小分子
- D-sorbitol 为渗透调节剂；40 mM、24 小时用于运输/形态比较。
- 动态检测
- 双通道活细胞成像后用 TrackMate 分析线粒体与溶酶体速度、过程性位移，另检查形态及 TDP43 定位。
测量指标与分析
- 线粒体/溶酶体平均速度与位移
- 近端与远端细胞器形态
- 图像中远端线粒体网络面积
- TDP43 胞质定位及可见聚集
同一轴突位置比较正常/变异、培养年龄及处理；变异模型数据汇总，轨迹和细胞不作为独立供者数。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 较早/较晚培养正常和变异神经元，成熟后期未处理与 40 mM D-sorbitol 处理 24 小时比较。
- 测试范围
- 预印本结果称 2 位患者、3 位正常供者，方法另称 4 条正常细胞系；动态批次至少 3 次独立实验，图 6 列 n=3–5。每系/条件/位置每次至少 5 段视频，通常每视频 200–500 条轨迹。
- 参照体系
- 相应未处理模型、正常对照及轴突近端/远端位置。
- 研究结果
- 预印本报告远端变异网络图像面积从 117.2±2.93 升至 168.0±5.62 pixel²（均值±SEM），线粒体/溶酶体速度与位移接近正常；未诱导可见 TDP43 胞质聚集。
适用条件与研究局限
- 方法依据 2017 预印本，未同行评议；2018 正式论文仅摘要核对，不将实验参数视为正式版已核。
- 预印本结果写 3 位正常供者，方法写 4 条正常细胞系；这两项分别以供者和细胞系为单位。
- 方法成像年龄写 14/32 天，结果概括 2/4 周，培养龄需结合原始实验确认。
- pixel² 是图像网络面积，不是物理轴突长度；轨迹分母不能替代独立实验。
来源与原文
- Age-dependent neurodegeneration and organelle transport deficiencies in mutant TDP43 patient-derived neurons are independent of TDP43 aggregation原始研究 · bioRxiv (preprint, not peer reviewed) · 2017-11-13