NAMs新方法学前沿

移植瘤扩增小细胞肺癌模型的 CF10 药敏

将活检经 PDX 扩增后形成三维水凝胶模型,比较 CF10、5-FU 及顺铂的 96 小时药物反应。

用途与模型

研究用途
评价小细胞肺癌患者来源材料对新型氟嘧啶聚合物的敏感性。
模型与细胞来源
4 份患者来源移植瘤提供的三维模型,原肿瘤、PDX 与模型均进行标志染色。
方法版本
原研究正式发表版本
实验形式
HyStem-HP 水凝胶、PDMS 涂层孔板和 CellTiter-Glo 3D 检测。

材料与平台

模型材料
HyStem-HP 基础组分包括交联剂、Heprasil 与 Gelin-S,加入光引发剂;每 10 µL 水凝胶混入 100000 个细胞,置于 PDMS 涂层孔中形成三维模型。
处理和对照
DMEM 中先培养 2–3 天,再接受 CF10、5-FU 或顺铂处理 96 小时;以未加药条件为参照。
测量与分析
CellTiter-Glo 3D 测量 ATP 相关活力,按未处理模型归一化;GraphPad Prism 生成 IC50 曲线,原方法注明各样本重复数为 3–6。

测量指标与分析

  • ATP 相关相对活力
  • 药物剂量反应曲线
  • IC50

各患者来源模型分别比较 3 种药物;个体模型 IC50 范围与图注汇总 IC50 保留各自口径。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
4 份 PDX 来源三维模型比较 CF10、5-FU 和顺铂。
测试范围
4 份患者来源模型,各样本检测重复数 3–6;12 名确诊患者中 8 对样本用于另行 RNA 分析。
参照体系
同一模型的未处理、5-FU、顺铂及 CF10 条件。
研究结果
CF10 IC50 为 4.864–27.57 μM,全部模型比 5-FU 更敏感。

适用条件与研究局限

  • 模型经移植瘤扩增,不直接由原活检完成药筛。
  • 正文顺铂各模型范围 45.4–114.2 μM,图 5 汇总值为 120.7 μM,原文未解释合并方式。
  • ATP 指标反映模型活力。
  • 配套动物研究使用 F10 及 1 条移植瘤,肿瘤生长变异较大。

来源与原文

  1. Dysregulated Pyrimidine Biosynthesis Contributes to 5-FU Resistance in SCLC Patient-Derived Organoids but Response to a Novel Polymeric Fluoropyrimidine, CF10原始研究 · Cancers · 2020-03-26

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