16 株细胞系视网膜类器官的形态分期核对
用活体整体形态划分 3 个发育阶段，再以光学相干断层成像（optical coherence tomography，OCT）、细胞标志及超微结构核对模型状态。
用途与模型
- 研究用途
- 为视网膜疾病和后续治疗评价选择与目标细胞相符的模型阶段。
- 模型与细胞来源
- 4 株人胚胎干细胞系和 12 株人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）系来源的视网膜类器官，包含不同遗传背景。
- 方法版本
- 2019 年原始研究版本
- 实验形式
- 同一培养体系中连续观察整体类器官，再对选定样本进行局部结构和细胞身份检测。
材料与平台
- 活体形态与断层成像
- 常规光学显微镜与 OCT 观察整体外观、腔隙和组织分层。
- 局部身份与结构核对
- 免疫染色、透射电镜及光学代谢成像，分别核对细胞组成、外节/突触及代谢活动。
测量指标与分析
- 3 个整体形态阶段
- 外侧祖细胞与光感受器分布
- 外节、带状突触及外界膜结构
- 内部神经节细胞维持情况
按形态阶段解释局部结构与细胞组成，并保留同一批培养物中阶段共存的情况。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 16 株细胞系的长期形态分期和多种结构检测对应；同一合作研究历时 3 年，涉及最多 12 名实验人员。
- 测试范围
- 16 株细胞系均至少观察到培养第 175 天，最长记录至第 470 天；F5 的视杆/视锥比例来自 3 株正常 iPSC 细胞系，每株至少 6 个类器官。
- 参照体系
- 不同整体形态阶段的局部细胞与组织特征，以及同批培养物的阶段差异。
- 研究结果
- 各细胞系的培养物均出现共同的 3 个阶段，但并非每个类器官都达到第 3 阶段；外层光感受器结构逐渐形成时，内部神经节细胞仍可能减少。
适用条件与研究局限
- 尚无药物集响应、诊断准确率或临床预测性能验证。
- 长期外层结构较完整，不代表全部视网膜细胞或成人组织功能均得到维持。
- 不能把培养天数直接作为每个类器官的发育阶段。
来源与原文
- Reproducibility and staging of 3D human retinal organoids across multiple pluripotent stem cell lines原始研究 · Development · 2019-01-09