NAMs新方法学前沿

工程心肌贴片的尺寸与密度验证

比较三维贴片起始密度、培养时间和面积对收缩力及电传导的影响。

用途与模型

研究用途
检验工程心肌成熟及扩大组织面积后的功能。
模型与细胞来源
人诱导多能干细胞(iPSC)心肌贴片及 3 条胚胎干细胞系的重复性比较。
方法版本
原研究所载版本
实验形式
基质包埋组织与柔性框架,漂浮动态培养;膜电位染料成像与恒长测力。

材料与平台

培养比较
7×7 mm 贴片用 100 万或 50 万起始细胞,动态培养 1–3 周;扩至 15×15 和 36×36 mm。
电传导
膜电位染料成像,计算传导速度及 80% 复极时程;不同尺寸采用相应成像系统。
力学
组织伸长至培养长度的 120%,1 Hz 刺激测主动/被动力,收缩力按横截面积归一化。

测量指标与分析

  • 总收缩力及归一化收缩力
  • 力—长度和力—频率关系
  • 传导速度
  • 动作电位时程
  • 组织结构

总收缩力与按横截面积归一化的收缩力分别报告,并比较细胞密度、培养条件和组织尺寸的影响。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
低/高密度及 3 种尺寸的体外功能比较。
测试范围
图 5 尺寸传导 11/6/7 份,归一化力 10/6/10 份贴片;来自 3–4 次分化。
参照体系
100 万起始细胞贴片、7 mm 小贴片及相应培养条件。
研究结果
低密度归一化收缩力更高;扩大面积后总收缩力增加,传导和归一化收缩力相近。

适用条件与研究局限

  • 部分成熟结构只存在少量细胞中。
  • 力—频率关系仍非完整成人样。
  • 未建立治疗药物筛选结果。

来源与原文

  1. Cardiopatch platform enables maturation and scale-up of human pluripotent stem cell-derived engineered heart tissues.原始研究 · Nature Communications · 2017-11-28

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