NAMs新方法学前沿

三维心肌芯片的低氧与复氧验证

把低氧处理、复氧与组织活力/节律及分子反应结合比较。

用途与模型

研究用途
建立缺血相关疾病模型的功能测量基础。
模型与细胞来源
人干细胞来源心肌细胞与心脏成纤维细胞,起始 4:1。
方法版本
原研究所载版本
实验形式
微流控结构中的静态三维组织,视频和荧光/分子检测。

材料与平台

氧条件
第 13 天的组织经历 21%、5% 或 1% 氧 24 小时;低氧荧光探针在二维细胞中验证氧条件,芯片内氧变化由扩散模拟评价。
复氧
更换新培养液并恢复 21% 氧,比较 1 小时及 24 小时。
测量
低氧期用 calcein AM/死细胞染料评价活力;复氧期用 EthD-III/DAPI 统计死亡核比例;视频测频率与相邻收缩间隔波动,培养液测乳酸。

测量指标与分析

  • 活细胞比例/死亡核比例
  • 收缩间隔波动
  • α-平滑肌肌动蛋白
  • 培养液乳酸
  • 缺氧相关基因表达

不同氧水平及复氧时间分别比较;组织结构、平均频率、间隔波动和存活分开评价。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
三维组织氧处理与复氧,另比较二维共培养的纤维化相关反应。
测试范围
三维共培养心肌组织,比较低氧 24 小时及复氧 1、24 小时的不同测量结果。
参照体系
21% 和 5% 氧及二维共培养。
研究结果
短期低氧未显著降低活力,却改变纤维化标志与节律波动;复氧后死亡比例升高。

适用条件与研究局限

  • 本研究静态培养,流动培养属后续方向。
  • 主要检验短期组织损伤,未比较治疗药物。
  • 复氧期间部分分子指标恢复,节律波动仍存在。

来源与原文

  1. Cardiac ischemia on-a-chip to investigate cellular and molecular response of myocardial tissue under hypoxia.原始研究 · Biomaterials · 2021-12-30

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