患者血清中 rhPAPPA2 的结合蛋白切割与 IGF-I 释放测定
将重组人妊娠相关血浆蛋白 A2（recombinant human pregnancy-associated plasma protein A2，rhPAPPA2）加入患者血清，比较完整 IGF 结合蛋白 3（IGF-binding protein 3，IGFBP-3）及游离胰岛素样生长因子 I（IGF-I）的变化。
用途与模型
- 研究用途
- 检查候选治疗蛋白是否在患者血清背景中切割结合蛋白、增加游离 IGF-I，并比较不同生化背景的反应。
- 模型与细胞来源
- 3 名同一家 PAPPA2 缺陷同胞的血清与 4 名无 PAPPA2 缺陷的特发性矮小（idiopathic short stature，ISS）男性患者血清；主体实验无细胞。
- 方法版本
- 2018 年 PAPPA2 缺陷同胞与 ISS 患者血清探索性比较
- 实验形式
- 同一血清设置未加酶和两档 rhPAPPA2，在 4 小时内以酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）重复测量两项蛋白指标。
材料与平台
- 血清来源
- 具有纯合 p.Ala1033Val 变异的 3 名 PAPPA2 缺陷同胞，以及 4 名特发性矮小患者。
- 候选与比较
- 重组人 PAPPA2 及等体积稀释液对照；加酶前另用 IGFBP-3 和 IGFBP-5 底物核实蛋白水解活性。
- 检测对象
- ELISA 分别测定完整 IGFBP-3 和游离 IGF-I；二者用于观察结合蛋白切割与游离激素变化。
测量指标与分析
- 完整 IGFBP-3 浓度
- 游离 IGF-I 浓度
- 随时间与候选添加量的变化
- PAPPA2 缺陷组与 ISS 组的反应差异
用线性混合模型处理重复测量和一个缺失数据点，考察时间、添加量和组别。图 3 的 0 分钟值已受检测孵育期间酶作用影响，同一血清在不同添加条件下起点有所不同；探索性分析未做多重比较校正。
研究设计与结果
机制研究
- 研究设计
- 在两组患者血清中，比较无加酶与两档 rhPAPPA2 后的完整结合蛋白和游离 IGF-I 时间变化。
- 测试范围
- 3 名 PAPPA2 缺陷同胞与 4 名 ISS 男性的血清，分别在多个时间点测量。
- 参照体系
- 同一份血清的稀释液对照、不同 rhPAPPA2 添加量及两组生化背景。
- 研究结果
- 缺陷组未加酶时两指标稳定，前后比较 P 值为 0.42 和 0.57；加酶后完整 IGFBP-3 减少、游离 IGF-I 增加。ISS 组同方向但增幅较小，两档条件的组间 P 值为 0.0005 和 0.01。作者概括缺陷组游离 IGF-I 为原水平 15–100 倍，ISS 组为 1.7–5 倍。
适用条件与研究局限
- 小样本概念验证，未作多重比较校正。
- 不同添加量的 0 分钟值已受检测孵育期间酶作用影响。
- 研究时 PAPPA2 的药代动力学和药效学资料缺乏，持续生长效应仍待后续研究。
- 单例补充观察使用血浆，完整 IGFBP-3 无显著变化，且未测 IGFBP-5。
来源与原文
- PAPPA2 as a Therapeutic Modulator of IGF-I Bioavailability: in Vivo and in Vitro Evidence原始研究 · Journal of the Endocrine Society · 2018-05-28