PDO 与 PDXO 的 72 小时卡铂/紫杉醇反应比较
按配对取材来源比较直接患者模型和移植瘤来源模型。
用途与模型
- 研究用途
- 研究模型材料扩增后是否保留患者的化疗反应差异。
- 模型与细胞来源
- 5 名高级别浆液性癌患者；每例直接腹水 PDO、移植瘤腹水 PDXO 和移植实体瘤 PDXO。
- 方法版本
- 原研究正式发表版本
- 实验形式
- UltiMatrix 三维培养，96 孔板 5 µL 基质滴，CellTiter-Glo 3D。
材料与平台
- 取材与模型
- 直接患者腹水肿瘤细胞，以及 NSG 鼠移植瘤腹水/实体组织。消化后 24 孔板每孔 50,000 细胞、50 µL UltiMatrix、450 µL 培养液；药筛采用第 3–9 代。
- 药筛接种
- 96 孔白色透明底板，每孔 20–30 个类器官、5 µL 基质滴；基质与培养液按 1:1 混合后调整数量，凝固后加 200 µL 培养液。
- 给药与对照
- 接种次日给予 1 µM 卡铂、10 nM 紫杉醇或组合，72 小时；0.1% DMSO 溶剂对照、10 µM 阿法替尼阳性杀伤对照。每个条件至少设 6 个技术复孔，2 次独立实验。
- 检测
- 按培养液等体积加入 CellTiter-Glo 3D，振摇 5 分钟后室温静置 25 分钟，BioTek Synergy Neo2 测发光。以未处理组均值为相对变化参照，进行单因素 ANOVA。
测量指标与分析
- 相对 ATP 活力变化
- 配对模型化疗反应
- 患者临床铂敏感分类
按同一患者和相同药物条件比较 3 类模型，另与已定义的临床铂敏感/耐药/难治分类对应。
研究设计与结果
临床关联研究
- 研究设计
- 直接 PDO 与两类 PDXO 药敏对应患者既有化疗类别。
- 测试范围
- 5 名患者：2 敏感、2 耐药、1 难治。
- 参照体系
- 同患者不同来源模型、未处理及阳性杀伤对照。
- 研究结果
- 总体保留铂敏感性；患者 2 和 20 的特定来源模型对紫杉醇或卡铂单药出现不同幅度。
适用条件与研究局限
- 样本小，未开展独立大型临床预测验证。
- 直接 PDO 来自腹水，实体瘤模型经过小鼠移植扩增。
- 72 小时仅测短期活力；完整微环境和长期耐药未在该测试中呈现。