鼠细胞血脑屏障芯片的电阻与通透评价
用鼠脑内皮与星形胶质细胞构建流动屏障，结合跨内皮电阻（trans-endothelial electrical resistance，TEER）、组胺扰动及不同大小示踪物检查屏障质量。
用途与模型
- 研究用途
- 为脑递送候选的体外评价检查屏障结构、稳定性和选择性；本研究本身未系统验证治疗药物的人体脑暴露预测。
- 模型与细胞来源
- 小鼠 b.End3 脑内皮细胞与 C8-D1A 星形胶质细胞，比较单培养及共培养。
- 方法版本
- 2012 年 b.End3/C8-D1A 流动屏障比较
- 实验形式
- 多孔聚碳酸酯膜分隔双流动隔室，内置电极连续测量，并与静态 Transwell 比较。
材料与平台
- 细胞与隔膜
- 2 种小鼠细胞系；隔膜厚 10 µm。图像显示约 0.4 µm 膜孔可能限制较宽的星形胶质细胞突起穿过。
- 运输参照
- 4、20、70 kDa 荧光标记葡聚糖及碘化丙啶，使用空白膜校正。
- 扰动比较
- 组胺用于动态电阻变化；pH>10 持续 4 小时用于屏障受损的通透比较。
测量指标与分析
- TEER 稳态及扰动后恢复
- 细胞存活、ZO-1 和 GFAP 形态/表达
- 按大小区分的示踪物通透
TEER 扣除初始背景后按面积校正；荧光标准曲线换算接收侧浓度，通透计算包含空白膜校正。共培养、单培养、静态与流动条件分别比较。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 2 种培养组成、流动芯片与静态 Transwell，以及组胺和极端 pH 扰动。
- 测试范围
- 图 6/9 各组 n>3；图 8 每个组胺档 3 个样本，原文未将其定义为独立动物或供者。
- 参照体系
- 相同细胞与培养液配方的静态模型、空白膜及所引体内通透资料。
- 研究结果
- 芯片共培养 TEER 通常>250 Ω·cm²，静态共培养约 25 Ω·cm²；较小示踪物更易通过，共培养通透较低；pH 升高使通透增加。
适用条件与研究局限
- 电阻比较同时存在细胞数量、体积、比例和电极差别，不能把全部差异归因于流动。
- 通透仍高于所引体内值；没有系统药物或人体暴露预测验证。
来源与原文
- Characterization of a microfluidic in vitro model of the blood-brain barrier (μBBB)原始研究 · Lab on a Chip · 2012-03-01