多孔板动态药物暴露与肿瘤细胞药效比较
计算机控制多孔板内药物浓度时间曲线，比较单药、两药联用与不同暴露时长的生长抑制。
用途与模型
- 研究用途
- 通过药代动力学（pharmacokinetics，PK）暴露曲线研究肿瘤药效和靶点抑制持续时间，并与小鼠移植瘤排序比较。
- 模型与细胞来源
- 人 Calu-6、A549 肺癌细胞以及 ATM 缺失的头颈鳞癌 FaDu 细胞，采用微流控装置调节多孔板培养液；各细胞系分别在多孔板中检测。
- 方法版本
- 2022 年 Microformulator、11–21 天药物暴露版本
- 实验形式
- 24 孔板或 96 孔板分区；独立加液/吸液管路，每 1 或 2 小时改变浓度，24 小时程序每日重复。
材料与平台
- AZD0364 比较
- Calu-6、A549 每孔 1 万个细胞；动态小鼠 PK 曲线与固定 2.16 μM 比较 11 天，检测汇合度、ATP 及细胞核。
- 两药联用
- FaDu 每孔 1500 个细胞；奥拉帕利与 DNA 依赖性蛋白激酶（DNA-dependent protein kinase，DNA-PK）抑制剂 AZD7648 的小鼠曲线分别复现，单药和联用观察 14 天。
- 暴露时长
- AZD7648 0.1 或 0.9 μM，每日 5、14 或 24 小时，联用奥拉帕利动态曲线观察 21 天；另测 DNA-PK 磷酸化。
测量指标与分析
- 细胞汇合度
- ATP 及细胞核检测
- DNA-PK 磷酸化
- 暴露浓度与持续时间
- 与小鼠药效的相对排序
每孔测量结果按相应对照归一化，比较固定峰值与动态浓度曲线，再比较 AZD7648 浓度和每日暴露时长的不同安排；各单药及联用的体内外药效排序分别比较。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 两种肺癌细胞的动态/固定暴露比较；FaDu 单药和联用曲线与小鼠移植瘤资料比较，另改变浓度和暴露时长。
- 测试范围
- 主要体外图每组 3 个技术重复或 3 个图像；体内参照来自小鼠移植瘤资料，各细胞系与动物组分别比较。
- 参照体系
- DMSO、固定峰值浓度、复现小鼠 PK 的单药及两药联用曲线。
- 研究结果
- 动态 AZD0364 区分 Calu-6 与 A549；AZD7648 及联用排序接近小鼠药效，但奥拉帕利单药的体外抑制更强。延长 DNA-PK 抑制提高联用效果。
适用条件与研究局限
- 输入为小鼠 PK 曲线，本文未验证人临床药效预测。
- 固定对照采用动态曲线最高浓度，未遍历全部静态浓度。
- 奥拉帕利单药体内外效果存在差异。
- 泵阀材料聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS）的药物吸收仍需随具体化合物评估。