MAPT 脑类器官的谷氨酸易损与 apilimod 存活评价
连续成像跟踪标记神经元，比较谷氨酸兴奋毒性与 apilimod 干预后的存活。
用途与模型
- 研究用途
- 为 FTD 相关候选作用评价提供患者背景下的神经元易损与存活终点。
- 模型与细胞来源
- MAPT-V337M 供者 iPSC 脑类器官与同基因背景对照；Synapsin1-GFP 阳性神经元。
- 方法版本
- 2021 年 4 月龄 MAPT-V337M/同基因背景对照版本
- 实验形式
- 三维类器官每日荧光成像、图像对齐、DRAQ5 辅助存活确认。
材料与平台
- 比较条件
- 4 月龄类器官比较无额外添加谷氨酸、5 mM 谷氨酸及 10 μM apilimod 共处理；图 7E 另为 3–4 月龄的 7 天终点，4 月龄图 7G 的逐日存活曲线另列。
- 测量对象
- 同一标记神经元的连续存活；神经元与类器官数量分别登记。
- 药理分母
- 图 7G 每条件 120 神经元/5 类器官；基线与谷氨酸子集另有 80/100 神经元各 5 类器官。
测量指标与分析
- 神经元存活曲线
- 谷氨酸诱导易损性
- 总 tau 与磷酸化 tau 伴随指标
逐日对齐同一神经元，Log-rank 比较生存；不同供者/类器官/细胞数分别报告。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 突变及同背景模型，比较刺激前后与 apilimod 共处理的神经元生存。
- 测试范围
- 3 供者模型用于研究；图 7G 每组 120 神经元来自 5 类器官，非 120 生物供者。
- 参照体系
- 无过量谷氨酸、谷氨酸+DMSO、apilimod；突变与同基因背景。
- 研究结果
- 突变神经元对谷氨酸更易损，apilimod 改善存活，但没有改变总 tau/P-tau。
适用条件与研究局限
- 低 4R tau 及缺小胶质细胞限制适用范围；需更多电生理确认。
- 结果限该变异/刺激及体外生存，未验证临床疗效。
- 存活指标不等同对 tau 病理或实际神经电活动的直接评价。