肺癌类器官的 NK 细胞囊泡药敏与免疫浸润比较
以患者肿瘤类器官和 HCC827 模型分别检测自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）细胞外囊泡的活力抑制与免疫细胞浸润。
用途与模型
- 研究用途
- 比较囊泡对顺铂反应和免疫募集的贡献，分开评价直接杀伤与共培养效应。
- 模型与细胞来源
- 患者来源模型；原图展示 6 个供者顺铂药敏，HCC827 为统一细胞系对照模型。
- 方法版本
- 原研究正式主文
- 实验形式
- 384 孔板用于 6 天药物暴露；96 孔板及 Transwell 用于 48 小时浸润。
材料与平台
- 活力条件
- 每孔 1000 个肿瘤细胞，25 µL DMEM/F12 培养液及 2% Matrigel；培养 6 天再加药，作用 6 天后 CellTiter-Glo；每条件 6 重复。顺铂 7 点 2 倍稀释从 100 µM 开始。
- 囊泡与顺铂
- NK 囊泡 10 µg，单用或配 6.25、12.5、25 µM 顺铂；患者、健康供者混合、自体、异体及术前/术后来源分别比较。
- 浸润条件
- 每孔 5000 个肿瘤细胞形成类器官，囊泡 20 µg；外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）先接触 10 µg/mL 纳武利尤单抗 45 分钟并洗涤；Transwell 加入 50000 个 PBMC，48 小时检测；3–6 重复。
测量指标与分析
- 半数抑制浓度（half-maximal inhibitory concentration，IC50）
- 归一化活力
- PBMC 总浸润荧光
- 活 PBMC 中 CD4/CD8/CD56 比例
活力归一化到未处理对照；以活的标记 PBMC 为流式分母，区分总浸润与亚群比例。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 不同囊泡来源及顺铂浓度进行活力比较；另在 PBMC 共培养中比较有无囊泡。
- 测试范围
- 6 个展示药敏的患者模型和 HCC827；每项实际可用模型不同，不以 10 例总队列作全部实验分母。
- 参照体系
- 未加囊泡、健康供者混合囊泡、不同患者囊泡和顺铂条件。
- 研究结果
- 患者囊泡最多使类器官活力下降约 40%–45%；患者来源类器官中，浸润 PBMC 的 CD56 阳性细胞比例提高，总浸润荧光和 CD8 阳性细胞比例变化不显著；HCC827 模型的浸润指标主要为非显著趋势。
适用条件与研究局限
- 供者样本少，健康供者为混合对照。
- 活力与浸润使用不同囊泡剂量和观察时间。
- 分子成分与功能为相关分析，没有相应因果干预验证。
来源与原文
- NK cell-derived extracellular vesicles enhance cytotoxicity and immune cell recruitment in non-small cell lung cancer原始研究 · Frontiers in Immunology · 2025-07-24