LiverChip12 与二维肝培养的胆汁酸及化合物反应比较
在原代肝细胞和 HepaRG 的二维与循环灌流培养中，比较基础及化合物处理后的培养液胆汁酸，并结合肝功能和损伤指标。
用途与模型
- 研究用途
- 评价不同培养环境下的化合物相关胆汁酸输出变化，选择适合胆汁淤积问题的测量终点。
- 模型与细胞来源
- 1 位供者来源人原代肝细胞和 HepaRG；胆汁酸部分为二维孔板与 LiverChip12 比较。
- 方法版本
- 2025 年 3 种化合物单浓度、7/30 天培养比较版本
- 实验形式
- 二维每孔约 10 万、LiverChip12 每芯片约 60 万细胞，循环流量约 1 μL/s；第 5、6 天给药，第 7 天测量，长期 HepaRG 在第 28、29 天给药、第 30 天测量。
材料与平台
- 化合物
- 波生坦 25 μM、α-萘基异硫氰酸酯（ANIT）50 μM、2-辛炔酸 70 μM，0.1% 二甲基亚砜对照。
- 胆汁酸检测
- 液相色谱–串联质谱测量胆酸、鹅去氧胆酸及其甘氨酸/牛磺酸结合形式，共 6 类。
- 配套功能测量
- 乳酸脱氢酶（LDH）释放、白蛋白、尿素和细胞色素 P450 3A4（CYP3A4）活性；其他平台及人诱导多能干细胞（iPSC）衍生肝细胞用于这些配套指标比较。
测量指标与分析
- 培养液总胆汁酸输出
- 6 类胆汁酸组成
- LDH 释放
- 白蛋白和尿素
- CYP3A4 活性
先比较基础功能，再按细胞来源、平台和培养时长评价 3 种化合物；胆汁酸与其他功能终点分开分析。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 原代肝细胞与 HepaRG 的二维/LiverChip12 培养在第 7 天比较胆汁酸；HepaRG 增加第 30 天比较，各化合物与溶剂对照比较。
- 测试范围
- 原代肝细胞为单供者 HU8373 批次；各测量样本数随平台与指标不同，部分基础功能条件为 3–6 个样本。
- 参照体系
- 二维孔板与 LiverChip12、原代细胞与 HepaRG、3 种化合物与溶剂对照，以及 HepaRG 第 7/30 天。
- 研究结果
- 原代 LiverChip12 基础总胆汁酸约为二维的 27 倍，第 7 天 3 种化合物均显著降低输出；HepaRG 第 7 天仅 ANIT/2-辛炔酸显著，第 30 天仅 2-辛炔酸显著。相应二维变化未显著。
适用条件与研究局限
- 胆汁酸检测未覆盖 OrganoPlate 或 iPSC 衍生细胞。
- 3 种化合物各测 1 个浓度，原代细胞来自 1 位供者；细胞分化、培养液和二甲基亚砜条件也有差异。
- 培养液胆汁酸减少尚未确定由合成、运输或细胞状态中的哪一环节主导。
- HepaRG 的基础总胆汁酸在 LiverChip12 与二维培养间是否有显著差异，主文两处表述不一致。
来源与原文
- Exploring the potential of liver microphysiological systems of varied configurations to model cholestatic chemical effects原始研究 · Archives of Toxicology · 2025-12-08