IPF 患者来源肺组织球的胶原侵袭与抗纤维化反应
以肺组织来源多细胞球的侵袭面积比较尼达尼布和吡非尼酮反应。
用途与模型
- 研究用途
- 研究患者间纤维化相关侵袭差异、药物作用及小样本临床关联。
- 模型与细胞来源
- 20 名 IPF 患者与 9 份供者肺组织的初代或第 1 代混合细胞。
- 方法版本
- 原研究首次发表版本；2017-04-20 Figure1B 正式勘误
- 实验形式
- poly-HEMA 涂层 U 底 96 孔板成球，转入平底 96 孔板 I 型胶原/DMEM。
材料与平台
- 组织和细胞
- 约 6×6 mm 组织用胶原酶 A 在 37 °C 消化 30 分钟，100 µm 过滤、红细胞裂解及初代培养；不富集单一细胞群。
- 组织球形成
- poly-HEMA 工作液 5 mg/mL、每孔 160 µL；每孔 8,000–10,000 个细胞，200 g 离心 1 分钟，37 °C、5% CO₂ 培养 16 小时。
- 胶原与暴露
- 2.1 mL I 型胶原 3.98 mg/mL 与 6.2 mL DMEM 配制、pH 7–7.4；50 µL 底层成胶，单球加入 100 µL 胶原并追加 50 µL 培养液；尼达尼布均为 1 µM、吡非尼酮均为 1 mM，另有无药条件。
- 成像与计算
- 过夜后用 AxioCam/AxioVision 记录核心面积 R 与包含外扩细胞总面积 H，计算（H−R）/R×100；每位患者每组 5 个组织球。
测量指标与分析
- 侵袭区百分比 ZOI%
- 给药/无药 ZOI% 比值
- 患者模型响应比例
- 肺功能及疾病进展关联
给药/无药 ZOI% 比值中位数小于 1 记为响应；与患者后续肺功能和进展分组作关联比较。
研究设计与结果
临床关联研究
- 研究设计
- 患者模型平行测试两种药物及无药条件，并与一小部分实际接受药物患者的病情变化比较。
- 测试范围
- 20 名患者、9 份供者；实际尼达尼布治疗 5 名、吡非尼酮 4 名；每条件 5 个组织球。
- 参照体系
- 同一患者无药模型、供者模型，以及同一药物治疗后的临床病情变化。
- 研究结果
- 单药统计尼达尼布响应 16/20、吡非尼酮 15/20；实际尼达尼布 5 名非进展者中 4 名模型响应，吡非尼酮 3 名模型响应且无进展，1 名模型不响应且有进展。
适用条件与研究局限
- 尼达尼布单药统计为 16 个响应模型，联合分类中对应模型合计为 14，原文计数存在差异。
- 局部组织取材可能不代表肺内不同区域的纤维化情况。
- 临床治疗子集仅 5 名和 4 名，模型与病情的对应来自观察性随访。
来源与原文
- 3D pulmospheres serve as a personalized and predictive multicellular model for assessment of antifibrotic drugs原始研究 · JCI Insight · 2017-01-26