NAMs新方法学前沿

集成四点阻抗的气道与肠道芯片屏障评价

以固定电极阻抗谱分开 TEER 和电容,评价上皮形成与可逆连接破坏。

用途与模型

研究用途
为药物及毒物响应研究提供上皮完整性、分化和测量质量依据。
模型与细胞来源
原代人小气道上皮;Caco-2 肠道上皮细胞系,两芯片分别测试。
方法版本
2017 年双通道固定电极,气道/肠道分别测试版本
实验形式
双通道多孔膜培养,四点交流阻抗与等效电路;非多器官联用。

材料与平台

结构与测量
上/下各 2 电极,气道 PET 膜及肠道 PDMS 膜;不同频率拟合液相电阻、TEER 与电容。
肠道功能对照
第 13 天 5 mM EGTA、2 小时,随后洗脱/恢复;处理 3 芯片,对照 2 芯片。
培养变化
气道 4 芯片长期 ALI;肠道 5 芯片观察分化后的电阻/电容联合变化。

测量指标与分析

  • 跨上皮电阻Ω
  • 细胞层电容
  • 阻抗谱拟合
  • 连接破坏及洗脱恢复

按等效电路分开培养液背景与上皮参数,电容辅助解释组织面积变化;论文以 Ω 报告电阻,面积归一化还须考虑有效测量范围。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
比较两类上皮形成、肠道灌流分化及 EGTA 可逆扰动。
测试范围
气道成熟曲线 4 芯片;肠道成长 5 芯片;EGTA 处理 3 芯片与 2 对照,非供者数量。
参照体系
匹配无 EGTA 芯片、处理前及洗脱恢复;分化前后电阻/电容。
研究结果
两类上皮均可追踪成熟,肠道电容升高时电阻下降;EGTA 使阻抗下降并在洗脱后恢复。

适用条件与研究局限

  • 有效测量面积不确定,结果主要适合同电极设计芯片内比较。
  • 当前功能验证为培养和螯合剂扰动,未建立药物集或临床预测。

来源与原文

  1. Organs-on-chips with integrated electrodes for trans-epithelial electrical resistance (TEER) measurements of human epithelial barrier function原始研究 · Lab on a Chip · 2017-05-30

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