家族性阿尔茨海默病脑类器官的分泌酶抑制剂联用评价
在 APP 基因重复患者来源脑类器官中，比较两种分泌酶抑制剂联用 30 天与 60 天后淀粉样 β 蛋白（amyloid beta，Aβ）聚集和磷酸化 tau 的变化。
用途与模型
- 研究用途
- 比较药物处理 30 天与 60 天后的疾病相关表型。
- 模型与细胞来源
- 携带 APP 基因重复的患者细胞系 APPDp1-1 的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）来源神经类器官。
- 方法版本
- 原研究所载实验版本
- 实验形式
- 从培养第 30 天开始处理，到第 60 或 90 天终点；每 4–5 天更换含药培养液。
材料与平台
- 两药组合
- β-分泌酶抑制剂 IV 与 γ-分泌酶抑制剂 Compound E 联用；低浓度分别为 1 μM 和 3 nM，高浓度分别为 5 μM 和 6 nM。
- 对照
- 二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）浓度相同的载体处理，以及健康来源类器官。
- 检测
- 免疫组织检测 Aβ 聚集颗粒的数量、大小与磷酸化 tau（Ser396）；病理图像分析限定距表面 250 μm 以内。
测量指标与分析
- Aβ 聚集数量
- Aβ 颗粒大小
- 磷酸化 tau 免疫反应
分别按 30 天与 60 天累计处理时长，将联用抑制剂与载体处理比较；Aβ 颗粒数量、大小和磷酸化 tau 信号分别分析。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 从培养第 30 天开始处理，到第 60 或 90 天终点；每 4–5 天更换含药培养液。
- 测试范围
- 药物实验采用 APPDp1-1 来源类器官，以单个类器官作为分析单位。
- 参照体系
- 对应载体处理与健康对照；低、高浓度组合。
- 研究结果
- Aβ 聚集数量在处理 30 天后减少，处理 60 天后高浓度组合的效果更明显；磷酸化 tau 在处理 30 天后未见显著变化（p = 0.69），处理 60 天后下降。Aβ 颗粒大小差异未达显著。
适用条件与研究局限
- 仅评价两药组合，未证明单药贡献或协同。
- 组织内部缺少灌流，图像分析限定表面 250 μm。
- 培养时间相关病理不代表已验证所有衰老特征。