乳腺癌细胞联合给药时序与协同检测
在癌细胞与非致瘤乳腺细胞系中比较吉西他滨和多柔比星的先后顺序，以时序匹配的单药曲线计算协同，并检测细胞周期与 caspase-3。
用途与模型
- 研究用途
- 筛查联合药物顺序和摩尔比对细胞抑制的影响，比较癌细胞与参照细胞系的反应。
- 模型与细胞来源
- MDA-MB-231 人三阴性乳腺癌细胞；MCF-10a 为非致瘤乳腺上皮细胞系参照。
- 方法版本
- 2018 年 MDA-MB-231/MCF-10a 时序与药物比例比较版本
- 实验形式
- 二维培养，联合药物浓度梯度及 3 种 72 小时安排；MTT、细胞周期和凋亡相关酶活性分别检测。
材料与平台
- 给药安排
- 同时给药 72 小时、吉西他滨 24 小时后多柔比星 48 小时、相反顺序 24/48 小时；单药剂量曲线采用匹配时序。
- 活力与协同
- MTT 代谢活力及组合指数 CI；另比较吉西他滨/多柔比星的摩尔比。
- 细胞状态
- 细胞周期分布与撤药后变化；caspase-3 活性按总蛋白归一化。
测量指标与分析
- MTT 代谢活力
- 时序匹配单药参照下的组合指数
- 细胞周期分布
- 总蛋白归一化的 caspase-3 活性
按相同药物浓度与总观察时间比较时序，CI 使用各自相同时序的单药曲线；癌细胞和参照细胞系的摩尔比结果分别计算。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 药物顺序、摩尔比及癌细胞/非致瘤细胞系比较。
- 测试范围
- 细胞活力比较至少 12 个受测孔；caspase-3 测量为 3 个重复，不作为独立供者数。
- 参照体系
- 单药、同时给药、反向顺序和 MCF-10a 细胞系。
- 研究结果
- 吉西他滨先用在 MDA-MB-231 中 CI 更低，在受测摩尔比范围内，CI 均低于 0.2；MCF-10a 在摩尔比高于 1 时转为拮抗。吉西他滨先用的 caspase-3 活性约为同时给药的 2 倍。
适用条件与研究局限
- 细胞活力来自 MTT，不独立确定死亡比例。
- 体外顺序优势没有在论文动物实验清楚重现。
- 只用两种细胞系，未纳入患者来源模型。
来源与原文
- Schedule dependent synergy of gemcitabine and doxorubicin: Improvement of in vitro efficacy and lack of in vitro-in vivo correlation原始研究 · Bioengineering & Translational Medicine · 2018-01-07