ALS 患者运动神经元的 MG132 应激反应评价
在肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）患者及正常人源运动神经元中，比较 MG132 引起的神经丝、损伤和凋亡反应，并设非运动神经元对照。
用途与模型
- 研究用途
- 为 ALS 候选药物筛选建立可观察的细胞病理及应激比较窗口。
- 模型与细胞来源
- 1 位 TAR DNA 结合蛋白 43（TAR DNA-binding protein 43，TDP43）G298S 患者与 2 位散发患者的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）来源神经元；正常对照和非运动神经元并行。
- 方法版本
- 2018 年原研究版本
- 实验形式
- 第 21 天分离铺板后培养 4 天，加入 0.6 μM MG132 处理 24 小时；结构染色与培养液损伤检测。
材料与平台
- 疾病与正常模型
- TDP43-1/-2 来自同一突变患者；SPOR-1/-2 为散发病例，图 7 有 IMR90/GM15 正常标签。
- 应激探针
- 蛋白酶体抑制剂 MG132，以相同处理比较运动与非运动神经元。
- 检测
- 神经丝包涵体比例、活化 caspase-3 及培养液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）；另检查线粒体密度。
测量指标与分析
- 神经丝包涵体比例
- 活化 caspase-3 阳性细胞
- 培养液 LDH
- 突起线粒体密度
分开比较患者/正常及运动/非运动神经元；相同 MG132 处理中的结构、凋亡与损伤终点综合判断。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 患者与正常模型在相同 MG132 暴露下比较，并设置非运动神经元对照。
- 测试范围
- 患者层面 1 位 TDP43 变异、2 位散发；图 7 未列明独立培养重复数。神经丝计数至少 500 突起/组、线粒体密度抽取 150 神经元为另项抽样。
- 参照体系
- 正常运动神经元及相应非运动神经元。
- 研究结果
- 患者运动神经元有更多神经丝包涵体、较高 LDH 与更多活化 caspase-3 阳性细胞；非运动神经元未呈相同差异。
适用条件与研究局限
- MG132 是应激探针，结果不是治疗挽救。
- 早期 TDP43 总量未显著改变；正常细胞受刺激也可出现位置变化。
- 独立培养重复数未明确，细胞或突起计数不替代生物重复。
来源与原文
- Modeling hallmark pathology using motor neurons derived from the family and sporadic amyotrophic lateral sclerosis patient-specific iPS cells原始研究 · Stem Cell Research & Therapy · 2018-11-15