扩增肺癌 CTC 的 72 小时 ALK 抑制剂药敏评价
比较患者血样扩增培养物对克唑替尼和塞瑞替尼的反应，结合成纤维细胞与敏感、耐药细胞系对照。
用途与模型
- 研究用途
- 研究血源肿瘤细胞的靶向药物反应，并解释混合细胞培养对活力测量的影响。
- 模型与细胞来源
- 1 例间变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）阳性肺癌初诊血样的扩增循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTC），培养中包含癌相关成纤维细胞。
- 方法版本
- 2016 年公开作者稿所载研究版本
- 实验形式
- 96 孔板，药物作用 72 小时；3 次纵向取样的基因检测为另一个实验。
材料与平台
- 起始材料
- 每次血样 5 mL；EpCAM/CD44 抗体组合捕获后与成纤维细胞共培养，在装置内 2 周、装置外约 1 个月。
- 药物与重复
- 克唑替尼和塞瑞替尼各 6 个浓度，每浓度 3 个技术重复；每孔 1,000 个细胞，处理 72 小时。
- 参照细胞
- 纯癌相关成纤维细胞、耐药参照 A549、ALK 重排敏感参照 H3122 与患者培养物分别测试。
测量指标与分析
- WST-1 吸光值反映混合培养物的活力。
- 非线性回归计算半数抑制浓度（half-maximal inhibitory concentration，IC50）。
比较患者培养物及 3 类参照细胞的药物反应。纵向荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）和测序结果与初诊药敏分别报告。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 单患者血样扩增与 2 种药物体外比较。
- 测试范围
- 1 例患者；药敏使用初诊培养物，每浓度 3 个孔。
- 参照体系
- 纯成纤维细胞、A549 耐药参照、H3122 敏感参照。
- 研究结果
- 克唑替尼 IC50 为 2,268 nM，塞瑞替尼为 1,664 nM；CTC 检出的 ALK 突变变化与 3 次活检对应。
适用条件与研究局限
- 单病例；培养物含成纤维细胞，WST-1 活力非肿瘤细胞专一指标；本篇未列 6 点具体浓度值，也未建立跨患者预测准确率。