晚期肺腺癌类器官靶向药测试与二维培养比较
将三维类器官药敏与临床结局比较，并测试二维转换是否改变反应。
用途与模型
- 研究用途
- 研究晚期肺癌分子背景、培养条件及靶向治疗反应的关系。
- 模型与细胞来源
- 83 个肿瘤类器官与 1 个正常样模型；临床对应 9 名患者，二维转换 5/9 成功。
- 方法版本
- 原研究首次正式发表版本
- 实验形式
- Matrigel 三维培养、超低吸附 96 孔药筛；胶原平板作二维转换。
材料与平台
- 建立与培养
- 48 孔板每 20 µL Matrigel 约 2,000 个细胞，覆盖 250 µL 气道类器官培养液；R-spondin1、FGF7、FGF10、Noggin、N-acetylcysteine、nicotinamide、A83-01、SB202190，初 2 天加 Y-27632。
- 短期药筛
- 解离后培养 5–10 天，释放类器官后在含 5% Matrigel 的 AdDF+++ 培养液中转至超低吸附 96 孔板，每孔接种 2,500 个类器官，1 小时后给药。临床比较用相应靶向药 100 nM 处理 3 天，CellTiter-Glo 3D 测 ATP。
- 重复与长暴露
- IC50 使用 3 次生物学重复，每次 3 个技术重复；敏感阈值 IC50<100 nM。48 孔长期试验每孔约 250 个类器官，每 3 天换药液、最长 15 天，ATP 相对于第 0 天计算。
- 二维转换
- 三维碎片置于胶原包被平板，1 个月内得到可传代二维培养；可再用 Matrigel 转回三维，保留同一 AO 培养液背景。
测量指标与分析
- IC50
- ATP 活力相对于第 0 天变化
- PFS 与影像反应
- Src/STAT3 磷酸化
- 二维转培养成功率
将匹配模型的 3 天靶向药反应与临床 PFS 及 RECIST 反应比较；同源二维/三维/二维再转三维模型比较 IC50 与信号。
研究设计与结果
临床关联研究；实验条件比较
- 研究设计
- 回顾性地对应模型药敏与患者后续 TKI 结局。
- 测试范围
- 9 名患者；8 名可按 9 个月 PFS 分组，另 1 名截止时仍在治疗。
- 参照体系
- 相应模型未用药条件、用药前第 0 天；患者临床 PFS 及影像。
- 研究结果
- 5 名无进展生存期超过 9 个月者，4 个模型敏感；3 名低于 9 个月者，2 个模型耐药，一致率 75%。
适用条件与研究局限
- 临床样本少且为回顾性分析，检测有效时间窗尚需前瞻性验证。
- 部分具体治疗为单例或少量模型；BRAF 临床患者具有多个变异克隆且随访短。
临床关联研究；实验条件比较
- 研究设计
- 将 9 个临床匹配三维模型转换二维，部分再转回三维。
- 测试范围
- 5 个成功二维模型，2 个的药敏与三维不同。
- 参照体系
- 同来源三维/二维培养，保留气道培养液背景。
- 研究结果
- YUO-004 二维培养对吉非替尼较敏感，转回三维后 IC50 升高；Src 抑制可增加其吉非替尼反应。
适用条件与研究局限
- 4/9 模型无法维持二维培养，培养形式改变可用样本集合。
- Src 相关变化和药物效应的比较主要来自 YUO-004 与 YUO-050 两个模型。
来源与原文
- Modeling Clinical Responses to Targeted Therapies by Patient-Derived Organoids of Advanced Lung Adenocarcinoma原始研究 · Clinical Cancer Research · 2021-06-03