病理判断为何仍需要同期参照
用历史动物数据构建虚拟对照，可减少非临床毒性研究中的同期对照动物。发表于 Toxicologic Pathology 的科学与监管政策委员会（Scientific and Regulatory Policy Committee）文章，集中讨论这种设计对解剖病理和临床病理终点的影响。
作者认为，同期对照仍最有助于控制当前试验的内外部变量，尤其在识别细微改变时。历史数据与本次动物在生物学、环境、饲养及操作条件上难以完全一致，纯虚拟对照可能丢失这些参照信息。
临床病理对分析前变量尤其敏感
临床病理指标变化范围较大，也容易受到采样和分析前条件影响。文章援引的概念验证研究中，31%–49% 的临床病理判读结果未能复现。
作者更支持混合设计：减少同期对照数量，再用虚拟对照补充。这样可在降低动物使用的同时，继续获得当前条件下的参照资料，也能持续更新历史数据池。
历史数据池需要保留哪些信息
文章提出，数据池应增加完整的个体动物元信息，特别是分析前和分析变量；保存组织的全切片扫描图像，可让本次研究的病理学家用一致术语与分级重新评价。足够大的跨机构数据池仍受到专有数据和共享障碍影响。
虚拟对照的可行性还随物种而变。作者指出，主要监管机构当时尚未接受在良好实验室规范（Good Laboratory Practice，GLP）研究中用虚拟对照全面替代同期对照；在其不合适的情形下，其他 NAMs 或调整研究设计也可帮助减少动物。这些内容属于委员会提出的考虑事项。