同一细胞系平行比较培养条件
用于眼病和治疗开发的人源视网膜类器官，往往采用不同培养补充物。法国蒙彼利埃神经科学研究所（Institute for Neurosciences of Montpellier）等团队在 Stem Cell Research & Therapy 比较同一人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）背景下的培养方案，跟踪到第 225 天，检查这些差异如何改变模型。
主要比较的方案 2 和方案 3 在早期相同，随后方案 3 增加牛磺酸、视黄酸（retinoic acid，RA）和 N-2 补充物，并调整不含维生素 A 补充剂的切换时间。RA 以 1 μM 从第 65 天加入，到第 120 天移除。各方案至少完成 5 次分化，多个补充条件的总比较与 RA 单独影响分别判断。
研究结合基因表达、免疫染色、明场形态、电子显微镜与完整类器官三维成像，分别检查细胞类型、外核层和表面光感受器结构。外核层（outer nuclear layer，ONL）是光感受器细胞体集中的区域。
含 RA 方案早期较慢，后期外核层保留更好
不含额外补充条件的方案 2 较早出现表面刷状边缘，反映光感受器内节与外节样结构。第 150 天，其刷状边缘平均长度为 44.0 μm，方案 3 为 23.1 μm，分别测量 47 和 60 个类器官。
到第 225 天，方案 2 刷状边缘仍略长，但外核层较薄：方案 2 为 47.3 μm、方案 3 为 54.2 μm，对应 29 和 67 个类器官。方案 3 细胞核排列更紧密，而方案 2 后期的层次完整性下降。早期表面结构出现更快，与后期组织保存较好并不是同一个结果。
基因时程也显示，加入 RA 后，部分光感受器及视锥标志的表达进度改变。研究据这些时间变化提出，RA 会延缓部分早期分化过程，同时改变较长期的光感受器组成。
去除 RA 的直接对照检验杆锥组成变化
为区分 RA 与其他补充物的作用，团队在方案 3 基础上另设去除 RA 组。该组更早形成表面刷状边缘；第 225 天外核层排列较疏松，视锥标志 arrestin 的相对荧光面积更大。视杆标志 rhodopsin 的相对面积则没有显著差异。
按归一化 rhodopsin 和 arrestin 荧光面积推算，含 RA 组的视杆、视锥相关比例约为 78.6% 和 21.4%，去 RA 组约为 54.3% 和 45.7%。图像定量每个条件分析 3 个类器官；这些组成估计由标志面积得到，视杆、视锥不同的长度和形态会影响这一估算。
方案 2 与 3 的另一比较也显示，在第 225 天，方案 3 偏向视杆相关组成。NR2E3 标志相对面积没有显著变化，说明不同标志并不都出现一致的定量差异。研究把标志、形态与组织排列并列使用。
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结构、表达与发育阶段共同决定模型状态
第 180 天的电镜检查显示，两种方案都有连接纤毛和原始外节样结构，但方案 3 的外核层更有序。第 225 天的共聚焦和双光子成像进一步显示，方案 3 视杆排列更规则，部分外节样结构伸出视锥层；方案 2 的视杆分布更不均匀。
不同检测之间也存在差别：较晚阶段，方案 2 的 RHO 转录表达较高，但方案 3 的蛋白标志及组织形态更支持视杆相关组成。作者提出，基因检测时混合类器官的成熟度不一，可能参与这一差异；原因仍未完全确定。
作者据此把 RA 的影响放在整个发育过程内理解：它改变早期速度，也影响后期组织结构。针对不同眼病或治疗开发目的，视杆与视锥组成、培养阶段及外核层完整性需要一起选择；仅比较单个时间点的分化速度会遗漏后期变化。