NAMs新方法学前沿

血管化胰岛球状体芯片的葡萄糖响应评价

在芯片比较灌流和血管化条件,测低/高葡萄糖刺激的胰岛素分泌及刺激指数。

用途与模型

研究用途
胰岛药物模型构建前的功能确认及培养条件比较。
模型与细胞来源
EndoC-βH5、FMA73 成纤维细胞和 HUVEC 组成的预血管化胰岛球状体,另可连接周围内皮网络。
方法版本
2024 年 COC/血管化胰岛功能研究版本
实验形式
COC 微流控器件与纤维蛋白水凝胶,静态/灌流及有/无周围血管床的组合比较。

材料与平台

胰岛球状体与 HUVEC 网络
细胞按 6:1:1 组合;球状体形成后在芯片继续培养。
COC 芯片、注射泵与纤维蛋白基质
10 通道器件定位三维组织,提供灌流与周围血管床。
KREBS 缓冲体系与 STELLUX 胰岛素 ELISA
低/高葡萄糖分别收集分泌液,测胰岛素;每份样本检测两次。

测量指标与分析

  • 基础胰岛素分泌
  • 高葡萄糖刺激分泌
  • 高/低刺激指数
  • 血管连接与培养形态

在同一球状体的低/高刺激液间计算指数,再比较培养方式;灌流和周围血管化两个因素分别处理。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
常规培养、芯片静态/灌流及有/无血管床的功能比较。
测试范围
常规培养 22 个、静态无/有血管床各 5 个、灌流无血管床 5 个、灌流有血管床 11 个球状体。每个点为一个模型的配对刺激指数。
参照体系
低葡萄糖和高葡萄糖、常规孔、芯片四种条件。
研究结果
灌流与血管化同时存在时刺激指数提高;只加入其中一个因素未显示同样改善。

适用条件与研究局限

  • 本研究主要确认培养功能,尚未进行药物反应验证。
  • 各组为球状体重复,独立细胞供者数未按该数量建立。
  • 主文培养气体文字有疑点,复用具体操作须核对原始规程。

来源与原文

  1. A microfluidic platform integrating functional vascularized organoids-on-chip原始研究 · Nature Communications · 2024-02-16

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