NAMs新方法学前沿

UV-PAM-Z 脑类器官局部细胞核损伤成像

用无标记光声图像比较核面积、卡尺直径与圆度,并按类器官交叉验证分类。

用途与模型

研究用途
类器官损伤指标与后续药物检测的成像方法评价。
模型与细胞来源
单一 BIONi010-C iPSC 皮质类器官,切片参照约 95 天、完整成像约 96 天。
方法版本
2026 年 266 nm、轴向调焦与乙醇挑战版本
实验形式
完整组织表层 ROI;2% 乙醇 6 小时处理,7 处理/7 参照类器官。

材料与平台

仪器与量化
266 nm UV-PAM-Z;MATLAB 重建/最大幅值投影,QuPath 核分割与形态量化。
验证参照
先光声后 DAPI 的同区域切片;乙醇组凋亡/DNA 损伤染色;成像后 Live/Dead 和 MTT。

测量指标与分析

  • 核面积
  • 最大卡尺直径
  • 圆度
  • 乙醇核分类
  • 成像后存活

每类器官均值做组间统计;线性 SVM 留一类器官对,625 核不跨训练/测试。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
成像/染色比较后进行单一挑战与分类验证。
测试范围
7+7 类器官、239 参照核/386 处理核;照射存活实验每组 5;非多个供者。
参照体系
未处理、同区域 DAPI 及未照射组。
研究结果
乙醇组面积/直径/圆度下降;3 特征平均分类准确率 83.6%、AUC 0.85。

适用条件与研究局限

  • 不是完整全类器官核普查;超过约 100 μm 深部信号减弱。
  • 单一模型与乙醇挑战,无独立药物集验证。
  • 紫外局部影响和投影重叠仍需测量;不能据整体非显著宣称无光毒性。
  • 未建立长期重复成像后的细胞功能验证。

来源与原文

  1. A Label‐Free Ultraviolet Photoacoustic Microscopy Enables Nuclear Imaging and Toxicity Assessment in an Intact Brain Organoid原始研究 · Small (Weinheim an Der Bergstrasse, Germany) · 2026-07-13

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