患者运动神经元的 TDP-43 应激恢复与药物成像比较
通过应激及恢复过程中的 TDP-43 胞质斑点，比较候选化合物对异常蛋白积聚的影响。
用途与模型
- 研究用途
- ALS 相关细胞表型的药物筛选；比较应激颗粒减少与持续 TDP-43 斑点减少两类结果。
- 模型与细胞来源
- 研究使用 TARDBP 和 FUS 变异患者及健康对照的 iPSC 来源运动神经元；图 8C–D 的恢复实验分析 4 株 TARDBP 变异细胞系。
- 方法版本
- 原研究正式发表版本
- 实验形式
- 384 孔板；细胞免疫染色与自动显微成像。
材料与平台
- 患者来源运动神经元
- TARDBP 变异细胞与健康对照细胞用于应激表型比较。
- 化合物与应激条件
- 图 8C–D 使用 2 μM 米托蒽醌、digitoxin 或 pyrvinium，预处理 60 分钟；随后用 5 μg/ml 嘌呤霉素处理 6 小时，再在去除嘌呤霉素后的 7 小时观察恢复。
- 染色指标
- TDP-43、G3BP1 免疫染色及 DAPI 核染色。
测量指标与分析
- TDP-43 胞质斑点面积与细胞核面积的比值
- G3BP1 应激颗粒分布
- 应激去除后的斑点持续情况
以细胞核面积归一化斑点面积；分别比较应激期和恢复期。图 8C–D 报告每株 TARDBP 细胞系 12 次生物学重复。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较 DMSO 与不同化合物处理后的应激恢复。
- 测试范围
- 4 株 TARDBP 变异细胞系；每株 12 次生物学重复。
- 参照体系
- 嘌呤霉素应激后的 DMSO 处理细胞。
- 研究结果
- 米托蒽醌和 pyrvinium 减少恢复后持续的 TDP-43 胞质斑点；digitoxin 没有同样作用。
适用条件与研究局限
- 药
- 物
- 在
- 应
- 激
- 颗
- 粒
- 检
- 测
- 中
- 的
- 作
- 用
- 与
- 持
- 续
- T
- D
- P
- -
- 4
- 3
- 斑
- 点
- 检
- 测
- 中
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- 作
- 用
- 不
- 同
- ；
- 本
- 项
- 结
- 果
- 来
- 自
- 细
- 胞
- 成
- 像
- 。