乳腺癌球状体的动态暴露与连续成像
比较每日重复的 BYL719 浓度时程与恒定浓度处理，连续测量球状体截面积和局部细胞密度。
用途与模型
- 研究用途
- 观察给药间隔内的生长抑制、恢复生长和药物反应延迟。
- 模型与细胞来源
- 带红色细胞核标记的人 T47D 乳腺癌细胞球状体；起始直径约 200–250 μm。
- 方法版本
- 2021 年 T47D 球状体灌流成像实验
- 实验形式
- 聚苯乙烯微流控灌流系统与三维活细胞成像，连续比较同一球状体。
材料与平台
- 药物暴露
- BYL719 每日 24 小时动态时程：约 1.5 小时升高、22.5 小时降低，共 3 轮；恒定处理 9.3 μM，按 24 小时区间匹配暴露曲线下面积。
- 流量与对照
- 总灌流 10 μL/min；恒定和动态溶剂对照各自设置，溶剂为 0.5% DMSO。
- 浓度与成像
- 液相色谱—质谱检查实际 BYL719 时程；约每 85 分钟记录三维图像，分析投影截面积。
- 局部密度
- 在 30 μm 厚度的选定区域内，按细胞核邻近关系分析局部密度；并非整颗球状体的细胞总数。
测量指标与分析
- 实际药物浓度时间曲线
- 球状体相对截面积
- 选定区域细胞核邻近密度
- 恢复生长的时间变化
按观察时程比较不同暴露组；相对面积以 4 小时图像为基准，结合药物浓度曲线观察生长变化与延迟。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 每日动态暴露与恒定浓度处理，以及各自溶剂对照。
- 测试范围
- 曲线比较每种条件 2 次实验，两个对照各 7 个球状体，两种药物组各 11 个球状体；同一 T47D 细胞系。
- 参照体系
- 按 24 小时匹配曲线下面积的动态与恒定 BYL719；恒定、动态溶剂对照。
- 研究结果
- 恒定处理逐渐缩小后趋稳，动态处理交替缩小与恢复生长。48 小时平均相对截面积约 0.89 与 0.92，对照约 1.31 与 1.27。
适用条件与研究局限
- 截面积和局部密度未直接给出整颗球状体体积或死亡比例。
- 单一细胞系、有限实验重复，未纳入肿瘤血管和免疫细胞。
- 单向灌流不断带走代谢物及分泌物，本次验证为直接作用的 BYL719。
来源与原文
- A Microphysiological Cell-Culturing System for Pharmacokinetic Drug Exposure and High-Resolution Imaging of Arrays of 3D Microtissues原始研究 · Frontiers in Pharmacology · 2021-12-21