人源 iPSC 内皮细胞的他汀功能与高糖干预评价
辛伐他汀改善基础及高糖条件下成管/NO，降低 YAP 入核与 EndMT 相关变化；GGTi298/RhoA 工具方向一致。SOX9 增强子缺失后辛伐他汀未恢复高糖成管缺陷。
用途与模型
- 研究用途
- 比较他汀对内皮功能的作用及高糖环境下的改善，结合通路干预解释候选机制。
- 模型与细胞来源
- 3 位健康供者的 iPSC 来源内皮细胞用于基础比较；1 名男性和 1 名女性共 2 位供者用于高糖环境评价。CD31 和 VE-cadherin 用于确认内皮身份。
- 方法版本
- 原文 2023-05-08 版本
- 实验形式
- 在培养板中分别测量成管、NO、表达和蛋白及组学指标；层流与振荡流为另一组补充比较条件。
材料与平台
- 7 种他汀与溶剂对照
- 初筛 0.1、1、10 μM；后续辛伐他汀主要为 1 μM。
- 高糖环境与渗透压对照
- 25 mM D-葡萄糖、20 nM 胰岛素、10 nM ET-1 培养 7 天；对照采用 25 mM 甘露醇平衡渗透压。
- GGTi298、RhoA 抑制工具及代谢物比较
- 分别比较通路干预与溶剂，GGPP 和角鲨烯补充结果单列。甲羟戊酸的原件浓度记载存在差异，当前条目不登记该剂量。
测量指标与分析
- 成管网络/结点数量
- 10 μM 乙酰胆碱过夜刺激后，培养液硝酸盐/亚硝酸盐换算的 NO
- NOS3、KLF2、VCAM1 等表达
- YAP 核/胞质分布与 SOX9 蛋白
- 细胞活性、增殖和 ROS
- RNA-seq/ATAC-seq/ChIP-seq 相关分析
主要药物处理为 72 小时，高糖环境培养 7 天；YAP 与组学特定实验为 24 小时，活性检测为 48 小时。不同终点按各自条件评价。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 七种他汀和溶剂比较；高糖/基础、高糖+药物/高糖比较；补充代谢物及通路工具作机制比较。
- 测试范围
- 基础模型为 3 位健康供者，高糖环境评价为 2 位供者；多数相关功能图登记 3 个生物样本，蛋白检测为 2 个生物重复。
- 参照体系
- 七种他汀和溶剂比较；高糖/基础、高糖+药物/高糖比较；补充代谢物及通路工具作机制比较。
- 研究结果
- 辛伐他汀改善基础及高糖条件下成管/NO，降低 YAP 入核与 EndMT 相关变化；GGTi298/RhoA 工具方向一致。SOX9 增强子缺失后辛伐他汀未恢复高糖成管缺陷。
适用条件与研究局限
- 健康供者环境模型、细胞成熟度与表观遗传重置限制患者预测；MA 原件浓度有未解决差异。SOX9 增强子缺失后药物未恢复成管，分子与功能终点需分别判断。
来源与原文
- Statins improve endothelial function via suppression of epigenetic-driven EndMT原始研究 · Nature Cardiovascular Research · 2023-05-08