NAMs新方法学前沿

小细胞肺癌类器官的 8 天药物暴露和 4 周撤药观察

先测量顺铂和依托泊苷的活力抑制,再连续观察撤药后类器官能否重新生长。

用途与模型

研究用途
研究小细胞肺癌模型的浓度反应和治疗后存活细胞扩增。
模型与细胞来源
主要药敏示例为 SPDTO#7;模型以支持长期扩增的 R-spondin1、Noggin 和 A83-01 条件培养。
方法版本
原研究正式主文
实验形式
96 孔板,每孔 200 个细胞和 10 µL Matrigel。

材料与平台

药物时间
接种后第 2 天加药,作用 8 天,第 10 天检测或撤药;方法浓度系列为 0.01、0.1、1、2、5 和 10 µM,原图另示 50 µM 顺铂撤药条件。
活力测量
CellTiter-Glo 测量细胞活力,拟合半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。
再生长观察
撤药后更换正常培养液,跟踪 1、2、4 周形态;顺铂与依托泊苷不同浓度分别记录。

测量指标与分析

  • IC50
  • 撤药后类器官形成
  • 再生长出现时间

分别比较给药末期的细胞活力,以及撤药后类器官重新形成的时间和形态,跟踪存活细胞的扩增。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
同一模型接受不同药物和浓度,撤药后继续培养。
测试范围
主要展示 SPDTO#7。
参照体系
顺铂和依托泊苷浓度组及未加药培养。
研究结果
顺铂 IC50 为 12.39 µM,依托泊苷 0.5382 µM;顺铂 50 µM 撤药 4 周再生长,依托泊苷 5 µM 在观察期没有再形成。

适用条件与研究局限

  • 详细药物演示集中于 1 个模型。
  • 每个传代没有独立重复,长期形成序列的验证有限。
  • 无较大供者临床复发对应资料。
  • 顺铂药敏曲线及撤药观察涵盖超过 10 µM 的条件,但方法文字列出的药物梯度止于 10 µM。

来源与原文

  1. Establishment and Long-Term Expansion of Small Cell Lung Cancer Patient-Derived Tumor Organoids原始研究 · International Journal of Molecular Sciences · 2021-01-29

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