RHO 拷贝数增加患者视网膜类器官的 PR3 反应评价
在一名 RHO 拷贝数增加患者的视网膜类器官中比较 PR3 三种剂量对视紫红质表达、定位和转录组的影响。
用途与模型
- 研究用途
- 评估特定 RHO 遗传背景下候选小分子的离体人源视网膜表型反应。
- 模型与细胞来源
- 一名 RHO 拷贝数增加患者及其未患病女儿各提供细胞，分别建立 iPSC 来源视网膜类器官。
- 方法版本
- 2024-04-25 原始研究
- 实验形式
- 患者类器官培养约 300 天后给予 PR3 三剂量或溶剂对照，比较一周处理反应。
材料与平台
- 患者与家系对照类器官
- RHO 四拷贝患者和未患病女儿各一名供者，多个类器官/分化批次不当独立患者。
- Photoregulin3
- 0.1、0.25、0.5 微摩尔分别与溶剂对照比较。
测量指标与分析
- RHO mRNA 和视紫红质蛋白表达
- 视紫红质向外节定位
- 视锥标志与 TUNEL 检测
- 0.25 微摩尔组转录组变化
分开比较表达下降与外节定位改善，报告高剂量对视杆细胞 RHO 表达的过度抑制。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 患者来源类器官 PR3 三剂量与溶剂对照，家系对照类器官提供基线。
- 测试范围
- RHO-CNV 患者 1 名、未患病女儿 1 名；RNA 测序样本来自 3 次独立分化，不能等同于 3 名患者。
- 参照体系
- 患者类器官溶剂对照、家系对照类器官；PR3 0.1/0.25/0.5 微摩尔。
- 研究结果
- PR3 降低 RHO 表达并部分改善定位；0.25 微摩尔外节区域定位更合适，0.5 微摩尔令表达蛋白的视杆细胞很少。
适用条件与研究局限
- 仅单一患者遗传背景；长期保护与临床视觉功能未验证。
- 图像/表达终点不等于整体视网膜功能。